生物化學實驗

《生物化學實驗》（第三版）增加了一些新的現代生化的分析和測試法，如遠紅外測定法；動態光散射法；透射電鏡法；原子力顯微鏡法等新內容。去掉不實用且陳舊的實驗，增加一些目前常用和實用的實驗，如增加比較簡單實用的 “殘餘法對粗脂肪含量的測定”“植物葉片在衰老過程中過氧化脂質含量的變化”“澱粉酶活力測定”等實驗。集基礎性與經典性、理論與實際相結合，融知識傳播、能力培養及素質教育為一體。

本教材適合於生物工程、製藥工程、藥學院製藥和食品工程本科專業教學使用，也可供生物工程相關專業研究人員參考。

章生物化學實驗的基本要求/001

節實驗的準確性/001

一、系統誤差/001

二、偶然誤差/002

三、過失錯誤/002

第二節實驗記錄及報告/002

一、實驗記錄/003

二、實驗報告/003

第三節實驗樣品的製備/004

一、動物臟器/004

二、微生物/004

三、細胞/004

第二章常見的實驗方法及基本原理/006

節透析/006

第二節沉澱/007

一、蛋白質的特性/007

二、常用的蛋白質沉澱方法/008

第三節色譜/010

一、色譜原理/010

二、幾種常見的色譜法/011

第四節電泳/017

一、電泳法的基本原理/018

二、幾種常用電泳法簡介/019

第五節分光光度法/021

一、基本原理/022

二、比色法/022

三、分光光度法/023

四、濁度法/024

第六節離心/024

第七節現代生化新方法/026

一、熒光分光光度法/026

二、旋光色散與圓二色性法/031

三、核磁共振波譜法/034

四、紅外光譜法/040

五、動態光散射法/042

六、透射電鏡法/044

七、原子力顯微鏡法/045

八、石英微晶天平/047

第三章普通實驗/050

實驗一實驗的基本操作及要求/050

一、玻璃儀器的洗滌及各種洗液的配製方法/050

二、攪拌和振盪/051

三、容量玻璃器皿的使用方法/052

四、思考題/053

實驗二糖的顏色反應/054

一、莫氏實驗/054

二、塞氏實驗/055

三、杜氏（Tollen）試驗/055

四、思考題/056

實驗三3，5-二硝基水楊酸（DNS）法測定還原糖/056

一、目的/056

二、原理/056

三、實驗器材/056

四、材料與試劑/057

五、操作方法/057

六、思考題/058

實驗四澱粉酶對殼聚糖降解過程的測定/058

一、目的/058

二、原理/059

三、實驗器材/059

四、材料與試劑/059

五、操作方法/059

六、思考題/060

實驗五殘餘法對粗脂肪含量的測定/061

一、目的/061

二、原理/061

三、實驗器材/061

四、材料與試劑/061

五、操作方法/061

六、結果與分析/062

七、注意事項/062

八、思考題/062

實驗六植物葉片在衰老過程中過氧化脂質含量的變化/062

一、目的/062

二、原理/063

三、實驗器材/063

四、材料與試劑/063

五、操作方法/063

六、結果計算/063

七、思考題/064

實驗七氨基酸的分離鑑定——紙色譜法/064

一、目的/064

二、原理/064

三、器材/064

四、試劑/064

五、操作方法/065

六、思考題/065

實驗八離子交換色譜法分離氨基酸/066

一、目的/066

二、原理/066

三、實驗器材/066

四、材料與試劑/066

五、操作方法/066

六、注意事項/067

七、思考題/068

實驗九蛋白質性質（一）——蛋白質及氨基酸的呈色反應/068

一、目的/068

二、呈色反應/068

三、思考題/073

實驗十蛋白質性質（二）——蛋白質等電點的測定和沉澱反應/073

一、蛋白質等電點的測定/073

二、蛋白質的沉澱及變性/075

三、尿蛋白定性檢驗/076

四、思考題/077

實驗十一蛋白質的製備——牛奶中提取酪蛋白/077

一、目的/077

二、原理/078

三、器材/078

四、材料與試劑/078

五、操作方法/078

六、思考題/079

實驗十二Bradford法測定蛋白質含量/079

一、目的/079

二、原理/079

三、器材/079

四、材料與試劑/080

五、操作方法/080

六、思考題/080

實驗十三紫外分光光度法測定蛋白質的含量/080

一、目的/080

二、原理/081

三、實驗器材/081

四、材料與試劑/081

五、操作方法/081

六、思考題/081

實驗十四ANS熒光分析法測定蛋白質的外源熒光/082

一、目的/082

二、原理/082

三、實驗器材/082

四、材料與試劑/082

五、操作方法/082

六、結果與分析/083

七、注意事項/083

八、思考題/084

實驗十五血清蛋白的醋酸纖維素薄膜電泳/084

一、目的/084

二、原理/084

三、器材/084

四、材料與試劑/085

五、操作方法/085

六、思考題/086

實驗十六多酚氧化酶的製備、化學性質及影響酶活的各種因素/086

一、目的/086

二、原理/087

三、實驗器材/087

四、材料和試劑/087

五、操作方法/088

六、思考題/089

實驗十七澱粉酶活力測定/089

一、目的/089

二、原理/090

三、實驗器材/090

四、材料與試劑/090

五、操作方法/090

六、結果與分析/091

七、注意事項/091

八、思考題/091

實驗十八根據底物濃度和酶反應速度之間的關係求米氏常數Km/091

一、目的/091

二、原理/091

三、實驗器材/093

四、材料與試劑/093

五、操作方法/093

六、思考題/095

實驗十九小牛胸腺DNA的製備及熔解温度的測定/095

一、目的/095

二、原理/095

三、實驗器材/096

四、材料與試劑/096

五、操作方法/096

六、結果與分析/097

七、注意事項/097

八、思考題/097

實驗二十DNA的瓊脂糖凝膠電泳/097

一、目的/097

二、原理/097

三、器材/098

四、材料及試劑/098

五、操作方法/098

六、思考題/099

實驗二十一質粒DNA的小量製備/099

一、目的/099

二、原理/099

三、實驗器材/100

四、試劑及材料/100

五、操作方法/100

六、思考題/101

實驗二十二酵母RNA提取與定性和定量鑑定/101

一、目的/101

二、原理/101

三、實驗器材/102

四、材料與試劑/102

五、操作方法/102

六、思考題/103

實驗二十三轉氨基作用/104

一、目的/104

二、原理/104

三、實驗器材/104

四、材料與試劑/104

五、操作方法/105

六、思考題/106

第四章綜合實驗/107

實驗一SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳及蛋白質印跡/107

一、目的/107

二、原理/107

三、器材/108

四、材料與試劑/108

五、操作方法/109

六、思考題/112

實驗二PCR擴增目的基因片段/112

一、目的/112

二、原理/112

三、器材/113

四、材料與試劑/113

五、操作方法/113

六、思考題/114

實驗三質粒DNA的酶切及連接/114

一、目的/114

二、原理/114

三、實驗器材/114

四、材料與試劑/115

五、操作方法/115

六、思考題/116

實驗四重組DNA質粒的轉化/116

一、目的/116

二、原理/116

三、器材/117

四、材料與試劑/117

五、操作方法/117

六、思考題/118

實驗五枯草芽孢桿菌鹼性磷酸酶的製備及酶活力的測定/118

一、目的/118

二、原理/118

三、實驗器材/119

四、材料和試劑/119

五、操作方法/119

六、思考題/121

實驗六雞卵黏蛋白的製備及活力的測定/121

一、目的/121

二、原理/121

三、實驗器材/122

四、材料和試劑/122

五、操作方法/122

六、思考題/125

附錄/126

一、實驗室規則和安全防護/126

二、常用儀器的使用/128

三、緩衝溶液/136

四、常用的硫酸銨飽和度計算表/140

五、色譜法常用數據及性質/141

六、分子生物學及基因工程常用試劑及數據/145

七、一些常用單位/153

參考文獻/155

董曉燕，1962年生，博士，天津大學教授，著有《生物化學》獲2011年教育部普通高等教育精品教材；《生物化學實驗》（工科類專業適用）進入2014年教育部啓動的國家精品資源共享課集成創新項目（iCourse）。