多環芳烴化合物

多環芳烴化合物

食品中的PAH污染有不同的來源，主要是環境和食品加工過程的污染。其中，加工過程又被認為是最主要的方式，包括食品的煙燻、烘乾和烹飪過程。國際食品法典已規定了加工(如煙燻、烘乾)及高温烹調(燒烤、煎炸)食品的PAH值，如在個別的煙燻魚和肉製品中的PAH限值為200μg/kg。

多環芳烴(PolycyclicAromaticHydrocarbonsPAHs)是煤、石油、木材、煙草、有機高分子化合物等有機物不完全燃燒時產生的揮發性碳氫化合物，是重要的環境和食品污染物。迄今已發現有200多種PAHs，其中有相當部分具有致癌性、如苯並[α]芘、苯並[α]蒽等、PAHs廣泛分佈於環境中，可以在我們生活的每一個角落發現，任何有有機物加工廢棄，燒或使用的地方都有可能產生多環芳烴，例如煉油廠，煉焦廠，橡膠廠和火電廠等任何一家排放煙塵的工廠，各種交通車輛排放的尾氣中，煤氣及其他取暖設施甚至居民的炊煙中等，據美國對八個洲大氣成分的分析顯示工業區大氣中的多環芳烴比農業業區高10多倍多環芳烴污染物已成為環境污染物中極重要的物質。多環芳烴PAHs是一種高致癌的物質。現在德國政府強制規定所以在德國政府出售的電動工具必須經過檢驗其中不含有過量的PAHs，要進入德國市場的電動工具必須通過專業的檢驗機構的檢測。

多環芳烴化合物

1、NAPNaphthalene萘

2、ANYAcenaphthylene苊烯

3、ANAAcenaphthene苊

4、FLUFluorene芴

5、PHEPhenanthrene菲

6、ANTAnthracene蒽

7、FLTFluoranthene熒蒽

8、PYRPyrene芘

9、BaABenzo(a)anthracene苯並（a）蒽

10、CHRChrysene屈

11、BbFBenzo(b)fluoranthene苯並（b）熒蒽

12、BKFBenzo(k)fluoranthene苯並(k)熒蒽

13、BaPBenzo(a)pyrene苯並（a）芘

14、IPYIndeno(1,2,3-cd)pyrene茚苯（1，2,3-cd）芘

15、DBADibenzo(a,h)anthracene二苯並（a，h ^[1]  ）蒽

16、BPEBenzo(g,hi)perylene苯並（ghi）北（二萘嵌苯）

人類在工農業生產。交通運輸和日常生活中大量使用的煤炭、石油、汽油、木柴等燃料、可產生多環芳烴的污染。每公斤燃料燃燒所排出的苯並[α]芘量分別約為:煤炭67～137mg，木柴61～125mg，原油40～68mg，汽油12～50.4。因此，人類的外環境如大氣，土壤和水中都不同程度地含有苯並[α]芘等多環芳烴.多環芳烴在大氣的污染為其直接進入食品—落在蔬菜，水果，穀物和露天存放的糧食表面創造了條件。食用植物也可以從受多環芳烴污染的土壤及灌溉水中聚集這類物質，多環芳烴污染水體，可以使之通過海藻，甲殼類動物，軟體動物和魚組成的食物鏈向人體轉移，最終都有可能聚集在人體中。前蘇聯科學家的研究表明，在城市及大型工廠附近生長的穀物，水果和蔬菜中的苯並芘含量明顯高於農村和偏遠山區穀物和蔬菜中所含的量，用這一地區的穀物製成的植物油和用這一地區穀物餵養的食用動物的肉及奶製品中都有明顯的高的苯並[α]芘含量。不過，即使在遠離工業中心地區的土壤中，PAHs的水平也可能很高，在遠離人羣居住的一些地方發現土壤中的PAHs含量可達到100～200μg/kg，主要是腐爛的蔬菜殘留造成的。有機物質在土壤微生物的作用下也可形成多環芳烴。中國一些地區的農民在瀝青路面上晾曬糧食，可造成多環芳烴對食物的直接污染，另外。甲殼類動物由於降解多環芳烴的能力較差，因而往往在體內積聚有相當多的苯並芘。多環芳烴作為環境污染物在食物中的作用不可被高估，食品在熏製和烘烤等加工過程中往往產生大量的多環芳烴，對人體的健康更具危害性。

多環芳烴的致癌性已被人們研究了200多年。早在1775年，英國醫生波特就確認煙囱清潔工陰囊癌的高發病率與他們頻繁接觸煙灰(煤焦油)有關.然而直到1932年，最重要的多環芳烴—苯並芘才從煤礦焦油和礦物油中被分離出來，並在實驗動物中發現有高度致癌性。多環芳烴的種類很多，其致癌活性各有差異。

苯並芘是一種較強的致癌物，主要導致上皮組織產生腫瘤，如皮膚癌，肺癌，胃癌和消化道癌。用含25μg/kg苯並芘的飼料飼餵小鼠140d，除使小鼠產生胃癌外還可誘導其白血球增多和產生肺腺瘤.每週三次攝入100mg的苯並芘，有超過60%的大鼠發生皮膚腫瘤；當劑量降為3mg時,大鼠皮膚腫瘤的發生率下降到約20%；當劑量恢復到10mg後，皮膚腫瘤的發生率又可急劇上升至近100%。因此，大鼠皮膚腫瘤與苯並芘有明顯的量效關係。1973年，沙巴特等人的研究表明，苯並芘除誘導胃癌和皮膚癌外，還可引起食管癌，上呼吸道癌和白血病，並可通過母體使胎兒致畸。隨食物攝入人體內的苯並[α]芘大部分可被人體吸收,經過消化道吸收後,經過血液很快遍佈人體，人體乳腺和脂肪組織可蓄積苯並芘。人體吸收的苯並芘一部分與蛋白質結合，另一部分則參與代謝分解，與蛋白質結合的苯並芘可與親電子的細胞受體結合，使制細胞生長的酶發生變異，使細胞失去控制生長的能力而發生癌變。參與代謝分解的苯並芘在肝組織氧化酶系中的芳烴羥化酶(Arylhydrocarbonhydroxylase，AHH)介導下生成其活化產物—7，8-苯並[α]芘環氧化物，該物質可在葡萄糖醛酸和谷胱甘肽結合，或在環氧化物水化酶催化下生成二羥二醇衍生物隨尿排出.但苯並芘二羥二醇衍生物經細胞色素P450進一步氧化可產生最終的致癌物—苯並芘二醇環氧化(Benzopyrenediolepoxide).該物質不可被轉化且具有極強的致突變性，可以直接和細胞中不同成分(包括DNA)反應，形成基因突變，從而導致癌的發生。

鑑於種種原因，FAO/WHO對食品中的PAHs允許含量未作出規定。有人估計，成年人每年從食物中攝取的PAHs總量為1～2mg，如果累積攝入PAHs超過80mg即可能誘發癌症，因此建議每人每天的攝入總量不可超過10μg。

食品的成分一般包括水、脂肪類化合物、芳香烴和有機酸等，其中含有的PAH物質是非極性物質，可以使用多種有機溶劑如氯仿、石油醚、醇類、丙酮、苯等多種物質進行提取。目前提取PAH物質的主要方法有固相萃取、超臨界流體萃取、超聲波提取和索式提取等幾種。通過有機溶劑提取到的PAH物質中可能還含有一定量的非芳烴雜質，這些雜質可能干擾PAH的定量檢測。因此，對於提取到的試樣，可以根據PAH具有的兩個特點即脂溶性和芳香性進行濃縮或純化。

對於提取和純化得到的試樣，需要藉助一些高精儀器進行分析。目前，PAH的檢測方法為高效液相色譜法、氣相色譜法、色質聯用分析方法、二階激光質譜法和酶聯免疫分析方法等。

1、高效液相色譜法（highperformanceliquidchromatography，HPLC），PAH的常規檢測方法為高效液相色譜法，其分離方法大多為梯度淋洗法。的國家標準為甲醇和水的梯度淋洗，而國外的方法為乙腈和水的梯度淋洗。上述兩種方法儘管能夠實現多環芳烴的分離，但其缺點是分析時間長（國家標準為60min），並存在基線漂移的問題很多研究者在PAH的富集方面進行了方法的探索和創新。液-液萃取的方法需要耗費大量的超純試劑，並且萃取液有時會出現乳化現象，既浪費試劑又容易導致誤差。鬱建栓採用固相萃取流動相進行等梯度洗脱，用熒光檢測器進行檢測，實現了試樣中痕量多環芳烴化合物的分離分析，富集和分離效果好，分析時間短，無基線漂移，同時節省了試劑，每個樣品的分析時間小於15min，利用熒光檢測技術實現了試樣中7種多環芳烴的痕量分析。7種多環芳烴的檢出限（ng/L）分別為：熒蒽1.17，苯並(a)蒽0.68，苯並(b)熒蒽1.02，苯並(k)熒蒽0.26，苯並(a)芘0.46，二苯並(ah)0.70，苯並(ghi)北1.29。試樣過柱流速為2ml/min時，7種多環芳烴的吸附回收率分別為：熒蒽125.5%，苯並(a)蒽98.5%，苯並(b)熒蒽95%，苯並(k)熒蒽73.7%，苯並(a)芘72.4%，二苯並(ah)78.5%，苯並(ghi)北78%。LiuYu等人[5]採用多孔層的固相微萃取技術（SPME）對試樣中的多環芳烴化合物進行富集，再聯合HPLC進行測定。多孔覆蓋層是通過5μm的硅石顆粒連接苯基、C8及單性和多性的C18固相以進行HPLC分析。該法也有幾個因素影響到PAH物質的萃取，如連接相的官能團、鏈的長短以及相的性質（單性或多性）。Garica等人考察了採用SPE（固相萃取）、SPME（固相微萃取）技術聯合HPLC以及熒光監測器測定飲用水中的PAH物質的可行性。研究了纖維性質、萃取化合物的量以及有機溶劑、鹽的投加量、取樣温度、取樣時間對SPME萃取效果的影響。對SPE技術考察了試樣投加乙腈的量、試樣存放的條件如温度和時間以及萃取溶劑的類型、體積對萃取效果的影響。試驗結果表明，兩種萃取技術聯合HPLC都可以用於飲用水中PAH物質的測定。相比之下，SPE技術比SPME技術在回收、準確性以及測定範圍上更有優越性。Yang等人採用臨界水的萃取方法，並採用HPLC技術進行測定PAH物質，也具有一定的可行性。

2、氣相色譜法

王丹華等人採用溶膠凝膠技術，加入自制的新化合物端羥基冠醚，成功地塗制了固相微萃取塗層，用半揮發性的有機污染物多環芳烴評價了塗層的基本性能，並對實際水樣中的多環芳烴採用GC方法進行了分析。該方法的線性範圍在0.1～10μg/L，檢出限在0.001～0.03μg/L，8種多環芳烴化合物測定的相對標準偏差在2.05%～9.80%，回收率在85%以上。其微萃取塗層是由4,5-二羥(丙基)甲醚基-苯並15冠-5合成。塗層主要由端羥基硅油、二端羥基冠醚、四乙氧基硅烷、含氫硅油組成，冠醚在塗層中的含量為9%(g/g)，經三氟乙酸(含5%水)催化水解，發生縮聚反應形成三維空間網絡結構。該方法重現性好，塗層厚度易控制，本實驗採用自制80μm聚硅氧烷冠醚的萃取頭，萃取頭長度1cm。

3、色質聯用分析方法

潘海洋等人蔘照美國EPA525.1方法，C18-固相萃取膜萃取飲用水中的有機物，利用GC/MS法鑑定多環芳烴(PAH)，使用16種多環芳烴混合標準樣繪製標準曲線，以內標法對PAH進行定量分析。採用本方法研究某水樣中的7種多環芳烴的含量，PAH的平均回收率為94.0%～97.7%，檢測限為0.001g/L。Veronica等人研究了固相微萃取技術（SPME）對水中的多環芳烴化合物進行富集並聯合GC-MS進行測定的情況，考察了PAH物質在離子和非離子膠束影響下的分離情況。使用85μm聚丙烯酸和100μm二甲基硅氧烷聚合物塗層的纖維和陰離子（十二烷基硫酸,SDS）、陽離子（十六烷基三甲基色氨酸，CTAB）、非離子（聚乙氧基-10-月桂醇，POLE）表面活性劑進行了PAH物質的萃取，結果表明SPME技術是一個可行的處理手段Steven等人採用SPME萃取和GC-MS測定空隙水（porewater，沉澱物中的空隙水）中的PAH物質（測定範圍ng/L～mg/L）。這種方法可以達到測定範圍的要求，同時要求的水樣體積小，可以減少水樣的收集、運輸以及貯存等程序。四種污染程度不同的沉積物（50mg/kg34PAH～10000mg/kg總PAH）用SPME技術進行預處理，每次用1.5ml的空隙水進行分析測定34種PAH。水樣通過離心這些沉澱物，並進行絮凝沉澱後獲得。定量校準通過向標準水樣中和空隙水中加入15種2～6環的、全氘化的PAH進行。SPME聯合GC-MS的響應因子可以進行22烷基的PAH的測定，也可以用來校準18組烷基PAH物質。DOC（4mg/L～7mg/L）不影響2～3環的PAH物質的測定；而4～6環的PAH的測定受DOC的濃度影響，其與DOC/水的分配係數有關（KDOC），logKDOC的範圍為4.1(熒蒽)～5.6(苯並[ghi]芘)。但是DOC的影響對EPA規定的34中PAH物質並沒有很大的影響，因為86%～99%的PAH物質是2環和3環的PAH

4、二階激光質譜法

Thomas等人採用二階激光質譜儀（two-steplasermassspectrometry,L2MS）測定PAH。採用自制的L2MS系統進行測定，用多模式的CO2激光儀(Alltec853MS，Lübeck，德國。λ=10.6μm,，0.6J/cm2,107.5ns)與樣品表面形成45℃的傾角進行消融。採用遠端機械控制方式使樣品能夠進行自動旋轉到新的角度以進行激光消融。通過光參振盪器（OPO）(MOPO-730D10,SpectraPhysicsLasersInc.，MountainView，CA)提供離子化的激光輻射，並通過應用Nd:YAG激發的激光調諧技(GCR-230,SpectraPhysicsLasersInc)。進行三次諧波輸出。在波長225～280nm範圍內進行離子化效率的研究，脈衝幅長為8ns。對水樣進行分析時，激光波長為250nm。Emmenegger等人[12]採用二階激光質譜法進行定量分析水中的痕量PAH物質（ng/L）。30ml水樣經過PVC膜進行萃取後，直接進行L2MS的測定。該方法可以進行3環到6環的PAH物質的定量測定，測定的範圍為2～125ng/L。此方法的萃取效率為75%～90%。

5、酶聯免疫分析方法

免疫分析法是近幾年發展起來以抗原與抗體的特異性、可逆性結合反應為基礎的新型分析技術。免疫反應具有很高的選擇性和靈敏性。作為相對獨立的檢測方法，即基於競爭結合分析原理的免疫測定法，包括酶聯免疫吸附測定(ELISA)、放射免疫測定法(RIA)、固相免疫傳感器等方法。目前使用最普遍的是酶聯免疫法(ELISA)，具有操作簡便、靈敏度高、樣品容量大、儀器化程度和分析成本低的優點，是目前理想的殘留篩選性分析方法之一，該方法在美國已經得到了很大程度的接受和應用。Barcelo等人[14]採用ELISA的方法測定和水中的PAH，同時將測定結果與GC-MS方法進行對比。其採用的預處理程序同Manuel等人的方法相同，水樣放置於經過Mucasol(Merz+Co)試劑洗滌和二氯甲烷浸洗的棕色玻璃瓶中（容積2.5l）。水樣經過玻璃纖維過濾，同時加入80mg/L的Na2S2O3（通過精加工的飲用水配置）作為脱氯劑。為了進一步抑制生物活性，所有的水樣通過加入6NHCl調節pH值為2。然後通過C18Emporedisks(商品型號及產地：JTBaker,Deventer,NL)進行萃取，PAH的回收率為70%～95%。Dietmar等人研究了採用ELISA方法測定PAH的可行性，並與HPLC測定的結果進行了對比。採用HPLC方法測定的水中主要含有2環和3環的PAH物質（萘、苊、芴、菲、蒽），也包含芘和熒蒽這些化合物。採用ELISA方法沒有發現假陰性（falsenegative）的樣品（即測定濃度小於0.2μg/L），但是存在18%假陽性（falsepositive）樣品存在（即測定濃度大於0.2μg/L）。

綜上所述，儘管目前已發展了多種分離和檢測PAH物質的方法，HPLC方法和GC-MS方法是具有普遍應用價值的方法。它們的測量精度高，適於標準化，但往往需要進行復雜的樣品處理，檢測靈敏度也受限於配套的檢測器，對設備的要求較高，隨着技術的發展可革新。酶聯免疫分析方法也會引起較大的關注，免疫法對樣品處理要求低、設備和操作簡單，比現行的方法靈敏度更高，特別適合於基層單位進行簡單快速的檢測使用以及大批量樣品的普檢初篩，但因其自身的侷限性，重現性和準確定量方面不及HPLC等方法，在實際工作中可將兩者結合，實現從初篩到定量的快速準確檢測。

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