谷胱甘肽

谷胱甘肽（glutathione，GSH）是由穀氨酸、半胱氨酸和甘氨酸結合，含有巰基的三肽，具有抗氧化作用和整合解毒作用。半胱氨酸上的巰基為谷胱甘肽活性基團（故谷胱甘肽常簡寫為G-SH），易與某些藥物（如撲熱息痛）、毒素（如自由基、碘乙酸、芥子氣，鉛、汞、砷等重金屬）等結合，而具有整合解毒作用。故谷胱甘肽（尤其是肝細胞內的谷胱甘肽）能參與生物轉化作用，從而把機體內有害的毒物轉化為無害的物質，排泄出體外。谷胱甘肽還能幫助保持正常的免疫系統的功能 ^[3]  。

谷胱甘肽廣泛存在於動、植物中，在生物體內有着重要的作用。在麪包酵母、小麥胚芽和動物肝臟中的含量很高，達100 ~ 1000 mg/100g，在人體血液中含26 ~ 34 mg/100g，雞血中含58 ~ 73 mg/100g，豬血中含10 ~ 15 mg/100g，在西紅柿、菠蘿、黃瓜中含量也較高（12 ~ 33 mg/100g），而在甘薯、綠豆芽、洋葱、香菇中含量較低（0.06 ~ 0.7 mg/100g） ^[4]  。

GSH作為一種細胞內重要的調節代謝物質，其既是甘油醛磷酸脱氫酶的輔基，又是乙二醛酶及丙糖脱氫酶的輔酶，參與體內三羧酸循環及糖代謝，並能激活多種酶，如巰基（SH）酶-輔酶等，從而促進糖類、脂肪和蛋白質代謝。GSH分子特點是具有活性巰基（-SH），是最重要的功能集團，可參與機體多種重要的生化反應，保護體內重要酶蛋白巰基不被氧化、滅活，保證能量代謝、細胞利用。同時，其通過巰基與體內的自由基結合，可直接使自由基還原成酸性物質，從而加速自由基的排泄，並對抗自由基對重要臟器的損害。Haddad等研究發現，GSH參與了脂多糖誘導的細胞因子轉錄的調節及I-KB/NF-KB信號通路的調節。Armstrong等發現，GSH含量的降低是一種潛在的凋亡早期激活信號，隨後產生的氧自由基促使細胞發生凋亡 ^[6]  。

谷胱甘肽藥物，廣泛應用於臨牀，除利用其巰基以螯合重金屬、氟化物、芥子氣等毒素中毒外，還用在肝炎、溶血性疾病以及角膜炎、白內障和視網膜疾病等，作為治療或輔助治療的藥物。近年來，西方科學家，尤其是日本學者發現谷胱甘肽具有抑制艾滋病毒的功能 ^[7]  。

最新研究還表明，GSH能夠糾正乙酰膽鹼、膽鹼酯酶的不平衡，起到抗過敏作用，還可防止皮膚老化及色素沉着，減少黑色素的形成，改善皮膚抗氧化能力並使皮膚產生光澤，另外，GSH在治療眼角膜病及改善性功能方面也有很好作用 ^[7]  。

谷胱甘肽作為體內一種重要的抗氧化劑，能夠清除掉人體內的自由基；由於GSH本身易受某些物質氧化，所以它在體內能夠保護許多蛋白質和酶等分子中的巰基不被有害物質氧化，從而保證蛋白質和酶等分子生理功能的正常發揮；人體紅細胞中谷胱甘肽的含量很多，這對保護紅細胞膜上蛋白質的巰基處於還原狀態，防止溶血具有重要意義 ^[7]  。

食品中添加谷胱甘肽可起到意想不到的作用：

1、加入到面製品中，可起到還原作用。不僅使製造麪包的時間縮短至原來的二分之一或三分之一，勞動條件大幅度改善，並起到食品營養的強化作用及其他功能 ^[8]  。

2、將其加入到酸奶和嬰幼兒食品中，相當於維生素C，可起到穩定劑的作用 ^[8]  。

3、將其拌到魚糕中，可防止色澤加深 ^[8]  。

4、加到肉製品和乾酪等食品中，具有強化風味的效果 ^[8]  。

谷胱甘肽檢測方法較多，比較常用的有碘量法、DTNB（Ellman試劑）法、亞硝基鐵氰化鈉法、熒光法、四氧嘧啶法和高效液相色譜法（ HPLC）。上述方法各有優點，在檢測GSH含量時可根據實際情況，選擇適合、靈敏、精確的檢測方法 ^[9]  。

原理：DTNB與谷胱甘肽的巰基反應生成黃色的5 - 硫代 - 2 - 硝基苯甲酸，在412 nm波長處有最大吸收峯，而DTNB在400nm以上幾乎沒有吸收峯。向含有谷胱甘肽的試樣中加入少量的DTNB，將反應液在412 nm處測定吸收值，根據吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量 ^[9]  。

1、DTNB貯存液配製：將0.01 mol/L的DTNB溶解於0.05 mol/L的磷酸緩衝液（pH7.0）中形成DTNB貯存液 ^[9]  。

2、DTNB分析液配製：將DTNB貯存液用0.5 mol/L、pH8.0的Tris - HCl緩衝液稀釋100倍，配成DTNB分析液，避光放置，現配現用 ^[9]  。

3、操作步驟：取谷胱甘肽標準品溶液或待測樣品溶液（0.1 ~ 3.0 mol/L）0.5 mL，加入到1.5 mL濃度為0.15 mol/L的NaOH溶液中，再加入3%的甲醛溶液05mL，在pH8.0、25℃下反應2 min，反應結束後，取反應液0.5 mL加入DTNB分析液，在25℃下反應5 min，于波長412 nm下測定吸收值。根據兩者的吸光度，計算差值，代入標準曲線，計算出谷胱甘肽的含量 ^[9]  。

原理：利用谷胱甘肽的還原性與碘酸鉀進行反應，當谷胱甘肽完全反應時，碘酸鉀將碘化鉀氧化為碘，碘使澱粉指示劑變成藍色，即為滴定終點 ^[9]  。

操作步驟：精確稱取谷胱甘肽樣品0.05 mg，放入10 mL燒杯，用2%的HPO₃溶解，移入100 mL容量瓶，用水定容至100 mL。吸取上述溶液5 mL放入100 mL 三角瓶內，再加入2% HPO₃液5 mL使之成為10 mL，然後向其中加入5%碘化鉀1 mL及澱粉指示劑2滴。採用0.001 mol/L的碘酸鉀滴定，以消耗0.001 mol/L碘酸鉀的數值與理論值2.445 mL一致時，則成品中谷胱甘肽含量為100% ^[9]  。

計算公式：

，式中，V-消耗0.001 mol/L碘酸鉀的體積（mL），2.445 -100%含量應消耗的體積（mL） ^[9]  。

原理：高效液相色譜法是由於溶質在同定相和流動相之間的分配係數、親和力、分子大小、吸附能力等不同，而進行連續分離的過程 ^[9]  。

操作步驟：

①色譜條件

色譜柱：Kromasil C18柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm） ^[9]  。

流動相：磷酸二氫鈉和辛烷磺酸鈉混合溶液（磷酸二氫鈉3.0 g、辛烷磺酸鈉1.0 g，加水溶解並定容至500 mL，用磷酸調溶液pH為3）：乙腈 = 96：4（體積比） ^[9]  。

檢測波長：210 nm，流速0.8 mL/min，柱温30℃，進樣量10 μL ^[9]  。

②製作標準溶液

準確稱取谷胱甘肽標準品適量，用去離子水溶解於容量瓶中，混合均勻，定容，製成25 μg/mL、50 μg/mL、100 Vg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL系列濃度樣品液，作為標準溶液 ^[9]  。

③樣品製備

準確稱取谷胱甘肽樣品，加去離子水，混合均勻，製成濃度為25 ~ 800 μg/mL的樣品溶液，作為分析溶液 ^[9]  。

④繪製標準曲線

將配置的谷胱甘肽標準液，分別吸取10 μL進樣測定，以谷胱甘肽谷胱甘肽生產技術濃度和峯面積繪製其標準曲線，根據標準曲線得出該曲線的迴歸方程。峯面積的變化應與谷胱甘肽的質量濃度呈線性關係，其擬合度應達0.9995以上 ^[9]  。

⑤樣品的測定

取谷胱甘肽樣品分析液10 μL，用高效液相色譜儀進樣測定，得到樣品溶液的峯面積，根據迴歸方程計算出谷胱甘肽的含量 ^[9]  。

阿拓莫蘭、汀諾、松泰斯、泰特、古拉定 ^[10] 

片劑：0.1 g；粉針劑：0.3 g、0.6 g ^[10]  。

谷胱甘肽是含有巰基的三肽化合物，在人體內具有活化氧化還原系統、激活酶、解毒作用等重要生理活性。谷胱甘肽在體內以還原型和氧化型兩種形式存在，其活性成分為還原型谷胱甘肽參與體內三羧酸循環及糖代謝，促進體內產生高能量，起到輔酶作用。還原型谷胱甘肽是甘油醛磷酸脱氧酶的輔基，又是乙二醛酶及磷酸丙糖脱氨酶的輔酶。還原型谷胱甘肽能激活體內的SH酶等，促進碳水化合物、脂肪及蛋白質的代謝以調節細胞膜的代謝過程。還原型谷胱甘肽能與多種外源性、內源性有毒物質結合生成減毒物質 ^[10]  。

本品用於慢性肝臟疾病的輔助治療。包括病毒性，藥物毒性、酒精毒性引起的肝臟損害．也可用於有機磷、氨基或硝基芳香化合物中毒 ^[10]  。

置於頰黏膜與齒齦間含服，成人每日3次，每次0.4 g（4片），一般12周為1個療程 ^[10]  。

（1）可用於化療（順鉑、環磷酰胺、阿黴素、柔紅黴素、博來黴素）的輔助用藥，可以減輕化療造成的損傷而不影響療效，從而增加化療的劑量 ^[10]  。

首次給藥劑量1500 mg/m²，溶於100 ml生理鹽水或5%葡萄糖注射液，15分鐘內靜脈輸注；在第2 ~ 5天，肌注，600 mg每天。環磷酰胺治療後，應立即靜脈15分鐘輸注以減輕化療對泌尿系統的影響。對於順鉑治療，還原型谷胱甘肽劑量不超過35mg/mg順鉑，以免影響化療，或遵醫囑 ^[10]  。

（2）可用於酒精、病毒、藥物及其他化學物質導致的肝損傷的輔助治療。

①對於病毒性肝炎，1200 mg，1次/日，靜脈滴注，30天；②重症肝炎，1200 ~ 2400 mg，1次/日，靜脈滴注，30天；③活動性肝硬化、1200mg，1次/日，靜脈滴注，30天；④脂肪肝，1800 mg，1次/日，靜脈滴注，30天；⑤酒精性肝炎，1800 mg，1次/日，靜脈滴注，14 ~ 30天；⑥藥物性肝炎、1200 ~ 1800 mg，1次/日，靜脈滴注，14 ~ 30天 ^[10]  。

（3）用於放療輔助用藥，照射後給藥，劑量1500 mg/m²，或遵醫囑 ^[10]  。

（4）可用於低氧血癥的治療，劑量500 mg/m，溶於100 ml生理鹽水，靜脈給藥，以後每天300 ~ 600mg肌注維持 ^[10]  。

（5）使用注意：（300～600 mg）肌注時必須完全溶於溶解液，溶解液需清澈無色。靜脈注射給藥，藥物能夠被溶解液溶解然後緩慢注射，靜脈滴注給藥至少需要20 ml溶解液 ^[10]  。

1．輕度口腔黏膜白斑、潰瘍、舌苔剝脱和疼痛等口腔不適 ^[10]  。

2．罕見突發性皮疹 ^[10]  。

3．偶爾有食慾缺乏，噁心，嘔吐，上腹痛等症。停藥後消失，注射局部輕度疼痛 ^[10]  。

1．當發生口腔不良反應時，建議停用本品 ^[10]  。

2．放在兒童不易觸及的地方 ^[10]  。

3．苯丙酮尿病人慎用 ^[10]  。

4．溶解後的溶液立即使用，剩餘的藥液不能再用 ^[10]  。

5．肌內注射僅限於需要此途徑給藥時使用，並應避免同一部位反覆注射 ^[10]  。