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過碘酸希夫反應
鎖定
- 中文名稱
- 過碘酸希夫反應
- 英文名稱
- periodic acid-Schiff reaction;PAS reaction
- 定 義
- 一種檢測糖類存在的化學反應。帶有鄰位羥基的單糖,經過碘酸氧化產生的醛基,與鹼性品紅反應,可顯現紅色。
- 應用學科
- 生物化學與分子生物學(一級學科),糖類(二級學科)
以上內容由全國科學技術名詞審定委員會審定公佈
- 中文名
- 過碘酸希夫反應
- 外文名
- periodic acid Schiff reaction
- 作 用
- 檢測組織中的糖類
- 簡 稱
- PAS反應
- 應 用
- 心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究等
過碘酸希夫反應概況
過碘酸希夫反應原理
PAS染色又稱糖原染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質。
過碘酸希夫反應應用
隨着醫學實驗技術的發展,糖原染色應用的範圍更加廣泛,如用以證明與鑑別細胞內空泡狀的性質 ,心肌病變及其他心血管疾病的診斷 ,糖原累積病診斷和研究 ,糖尿病的診斷和研究 ,用於某些腫瘤的診斷等。除用於糖原的鑑定和黏液的顯示外 ,還可以觀察腎小球基底膜 、結腸杯狀細胞 中性黏液物質 、阿米巴滋養體和黴菌的着色。臨牀診斷、分類和治療提供 了重要的依據。
過碘酸希夫反應方法
過碘酸希夫反應固定液
Carnoy固定液: 純酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精.
過碘酸希夫反應液配製
1.過碘酸酒清夜配法:
保存於冰箱內,用棕色瓶,可用兩週.
2.Schiff氏液:
0.5克鹼性品紅加入100毫升蒸餾水中,時時搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃後過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室温中至少靜置24小時,然後密封冰箱保存.
3.Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 純酒精 23ml
5.哈瑞或邁耶蘇木精 略
過碘酸希夫反應染色步驟
2. 蒸餾水洗
3. 過碘酸酒清夜10min
4. 自來水沖洗10min
5.Schiff氏液10min
6. 流水沖洗5min
7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細胞核染色過深可用鹽酸酒精分化)
8. 流水沖洗5min
9. 常規脱水、透明、封固
過碘酸希夫反應結果
PAS陽性為紅色,細胞核藍色。
過碘酸希夫反應實驗效果
過碘酸希夫反應準備
1、10g/L過碘酸液
2、Schiff染液:
鹼性品紅0.5g
DH2O 100ml
卻至25℃加入偏重亞硫酸鈉0.5g,混合,置於帶塞的棕色瓶中,放於暗處24小時,染液為無色,如為微紅則
加活性炭1-2g,混合過濾,如過濾液仍有紅色,應再加少許活性炭,時紅色完全被吸收為止。製成後置於棕色
瓶內保存在冰箱備用,如變為紅色,則不能使用。
4、蘇木素液:
蘇木素0.9g
95%乙醇 10ml
銨(鉀)明礬 20g
DH2O 200ml
將蘇木素溶於95%的乙醇,鉀明礬溶於水(可加熱),然後將蘇木素液加入明礬液中混合,用強火煮
5ml,可使細胞着色清楚。
過碘酸希夫反應流程
1、將新鮮血片或骨髓片用95%乙醇固定10分鐘。
2、10g/L過碘酸液作用20分鐘
3、DH2O洗滌幾次,晾乾
4、Schiff染液,60分鐘
5、用自來水洗滌15分鐘(細水長流沖洗)
6、蘇木素染液10分鐘。
7、自來水沖洗15分鐘,待幹。
過碘酸希夫反應結果
陽性反應,胞漿呈紅色,陰性反應,胞漿呈無色;
在正常血片中RBC不染色;
PLT染成深紅色;
中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒;
單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒;
少數淋巴細胞的胞漿內含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;
巨核細胞的胞漿內呈彌散紅色或深紅色。
巨核細胞的胞漿內呈彌散紅色或深紅色。