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鐵蛋白
鎖定
- 中文名
- 鐵蛋白
- 外文名
- Ferritin
- CAS號
- 79468-83-0
- EINECS號
- 232-704-0
- 分子量
- 500 kDa
鐵蛋白結構
鐵蛋白的分子結構是由一層蛋白殼圍繞着鐵和磷酸鹽分子組成的鐵核,外徑12~13nm,分子量500kDa。從不同來源(如人、馬、牛蛙和細菌等)的鐵蛋白結構特徵來看,所有的鐵蛋白雖然在一級結構上變化很大(氨基酸序列相似性有時才達到14%),但本質上都有相同的體系結構。蛋白殼均為由24個亞基以高度對稱性方式組成的內空心結構,空心直徑約為8nm,其中的氫氧化鐵核中可積累多達4000個鐵原子且不影響蛋白表面和與其它分子的相互作用;蛋白亞基中包括亞鐵氧化的接觸反應位點和與溶劑進行交換的親水小孔。
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鐵蛋白特性
鐵蛋白具有耐稀酸(pH值2.0)、耐稀鹼(pH值12.0)、耐較高温度(70~75℃水温下不變性)等特殊性質。在很多研究中,就是利用鐵蛋白的這些特性,從動物組織中提純出該蛋白。
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鐵蛋白分佈
蛋白質殼具有親水性,故鐵蛋白可溶於水並可溶於胞漿或血漿中,在細胞內、外液中均較穩定。鐵蛋白主要是存在於細胞質中,但是在脊椎動物的線粒體和細胞核也有發現,並且在昆蟲中是一種分泌蛋白。鐵蛋白是體內鐵的主要儲存形式,其在脾臟、肝臟、骨髓中含量最高,在其它組織血清、血細胞等中也有發現。
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鐵蛋白存在方式
動植物體內廣泛存在的一類貯存鐵的蛋白。在哺乳類動物的肝和脾中含量最多。其外徑約12~14nm,空囊腔徑長約6nm,外殼(即脱鐵鐵蛋白)由24個亞基組成,每個亞基約含163個氨基酸殘基,每個分子最多可結合4500個鐵原子。分子量約為450kd。結合鐵的鐵蛋白是“溶”於水的,血漿鐵蛋白的濃度與體內儲存的鐵成正比。
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近幾年來發現肝癌還含有一種酸性的異鐵蛋白,稱為癌胚異鐵蛋白,可能有助於早期診斷。肝癌患者治療有效者血清鐵蛋白下降,而惡化和再發者升高,持續增高則予後不良,故血清鐵蛋白測定可作為療效監測手段之一,特別是對AFP陰性的患者尤有意義。
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鐵蛋白鐵蛋白的性質
鐵蛋白是一種含鐵的蛋白質,廣泛存在於各種哺乳動物的臟器如肝、脾、腎和骨髓內,尤以脾臟和肝臟為多。馬脾臟含有最豐富的鐵蛋白,故一般均由馬脾臟內提取,並已結晶成功。它的特點在於含有約23%的鐵,以氫氧磷酸高鐵( 分子量約為120,000)形式存在,有四個Fe(OH)2顆粒,鐵在內部的分佈是均勻的,使鐵蛋自呈棕色。由於鐵原子具有很強的電子散射能力,故在電子顯微鏡下明顯地呈深暗色的膠粒結構,標記到抗體上以後仍可保持此特徵。
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鐵蛋白提取及純化
鐵蛋白以肝、脾含量較高,其中馬脾臟含量最高,標記用的鐵蛋白主要是從馬脾臟中提取。馬脾臟來源不便,可用市售鐵蛋白相對分子質量45000。棕紅色結晶。商品為4次結晶品,懸浮於飽和硫酸銨溶液中。一種結合鐵離子輔基的蛋白質,它以脱鐵蛋白為外殼,環繞着4個分開的羥化鐵-磷酸鹽,形成電子緻密的結合型蛋白質。在製備的過程中,加入N,N-1,3-丙二胺偶合鐵蛋白,可成為正離子化鐵蛋白。密封、4℃保存。
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鐵蛋白鐵蛋白的鑑定
1、電鏡鑑定
2、抗體和鐵蛋白的結合
戊二醛一步法:在0.9mL的0.1mol/L磷酸緩衝液(pH值7.0)中溶解15mg鐵蛋白和3mg抗體,加入0.1mL戊二醛,在37℃中放置24h,加入0.01mol/L賴氨酸中止反應,反應物加入0.02%NaN3防腐。
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戊二醛二步法:在每毫升0.1mol/L磷酸緩衝液(pH值7.0)中溶解50~80mg鐵蛋白,加入戊二醛使其終濃度0.05%~0.15%,在37℃中放置2h後,過G-25柱,去除戊二醛,收集洗脱峯,按抗體,鐵蛋白1:5的比例,在37℃反應12h,加入0.01mol/L賴氨酸中止反應,反應物加入0.02%NaN3。
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3、鐵蛋白標記抗體的純化
鐵蛋白標記抗體後的混合液中含一些未標記的抗體蛋白等,應儘量去除。純化方法:將標記的抗體複合物,在4℃的條件下加入1:3體積的飽和硫酸銨飽和度為25%,4000rpm離心15min,去上清將棕黃色標記的鐵蛋白沉澱溶於少量0.1mol/L磷酸緩衝(pH值為7.2),過G-25柱除鹽。
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4、鐵蛋白免疫電鏡標記流程
鐵蛋白臨牀意義
血清鐵蛋白是體內含鐵最豐富的一種蛋白質。肝、脾、紅骨髓及腸黏膜是鐵儲備的主要場所,約佔全身總鐵的66%。測定血清鐵蛋白是判斷體內鐵貯儲量的重要指標。在診斷缺鐵性貧血、鐵負荷過度、營養狀況調查等方面都有重要意義。鐵蛋白作為一種腫瘤標誌物,對臨牀某些惡性腫瘤的診斷也具有一定的參考價值。
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鐵蛋白參考值範圍
鐵蛋白減低
見於缺鐵性貧血、失血等。(無併發症)
鐵蛋白增高
鐵蛋白原因症狀
鐵蛋白原因
血清鐵蛋白升高原因是鐵蛋白的來源增加或存在清除障礙。如患肝癌、肺癌、胰癌、白血病等時,癌細胞合成的鐵蛋白增加,使血清鐵蛋白升高。患肝病時肝細胞受損功能下降,使血清鐵蛋白升高。
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肝癌患者有鐵蛋白增高的原因可能是:
鐵蛋白症狀
鐵蛋白偏高的症狀有以下幾點:
2、初期的肝癌症狀隱匿極深,往往只是出現食慾不振,上腹悶漲和乏力,B超檢查會出現輕度肝腫大。
- 參考資料
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- 1. 熊立凡,胡曉波主編.明明白白看化驗單(第3版):上海科學技術出版社,2016.01
- 2. 鐵蛋白的結構、功能及表達調控 .知網[引用日期2019-11-05]
- 3. 血清鐵蛋白水平診斷原發性肝癌的價值 .萬方數據.2018-03-08[引用日期2018-09-29]
- 4. 陳仁等編.免疫學:人民衞生出版社,1965年09月第1版
- 5. 楊勇驥,湯瑩,葉煦亭,雷長海主編;葉煦亭,湯瑩,劉紅等編.醫學生物電子顯微鏡技術:第二軍醫大學出版社,2012.08
- 6. 俸家富,黃文芳主編.現代臨牀檢驗診斷大全=MODERNCLINICALLABORATORYDIAGNOSTICMANUAL:四川科學技術出版社,2013.09
- 7. 林松元主編.健康體檢一點通:福建科學技術出版社,2014.03
- 8. 血清鐵蛋白升高在成人噬血細胞綜合徵診斷中的作用 .中國知網.2014-4[引用日期2017-04-28]