-
熒光檢測
鎖定
- 中文名
- 熒光檢測
- 外文名
- fluorescent detection
- 性 質
- 自然發光反應
- 途 徑
- 通過熒光素酶與 ATP進行反應
- 應用於
- 化妝品製造業中
熒光檢測主要缺點
熒光檢測的主要缺點在於只有少數化合物產生熒光。大多數的分子不發熒光,但含有可衍生的官能團用於合成能發熒光的衍生物,例如,鄰苯二甲醛是一種常用熒光基團用於柱後衍生氨基酸。雖然熒光檢測很靈敏,但對於常見的樣品分析來説不需要如此高的靈敏度。因為ELSD的響應不依賴於熒光基團,所以不需要衍生,因此大大降低了樣品預處理和分析時間。
熒光檢測基本特點
熒光定量:採用國際主流的熒光定量PCR技術,迅速提升技術水平。
封閉操作:全部檢測過程均為閉管操作,於反應管處檢測熒光,有效防止污染,解決PCR技術中最棘手之難題。
安全:全程無毒檢測。
操作簡便:省去後處理的煩瑣過程。
直接打印:直接打印結果,無須記錄大量數據。
故障率低:維護非常簡單。
節約資源:可利用現用PCR擴增儀,最大限度節約資源。
熒光檢測使用方法
熒光檢測流式
優點是速度快,非常適合做大數量統計,且樣品只被檢測一次,完全不用擔心熒光淬滅的問題。缺點是隻能檢測熒光的有無、強度大小,無法提供空間定位信息,無法做熒光定位變化的實驗;由於樣品只被檢測一次,因此無法對同一個樣品進行連續觀察。例如,做膜蛋白定位時會得到這麼一個結果——用流式可以檢測出信號,但是用顯微鏡卻看不到東西,排除儀器和濾光片選擇問題,很可能是核的自發熒光或非特異標記造成流式的假陽性結果。
熒光檢測熒光顯微鏡
剛好與流式互補,可很好地進行空間觀察,判斷目標蛋白的定位,但是不適合做大流量檢測,估計沒人能經得起時間的考驗。有不同倍率的物鏡選擇,可以使用高倍物鏡看精細結構,或用小倍率物鏡做少量統計。與之搭配的CCD和軟件,是系統能否發揮性能的關鍵。尤其是CCD,從那麼多商品裏選一款合適的不容易,需要了解很多知識否則只能聽別人忽悠。
熒光檢測共聚焦
熒光顯微鏡的升級產品,具有很好的光學層切效果,能得到很好三維定位信息。但是,如果使用共聚焦的目的僅僅是為你的樣品拍一張靚照,取得一張好看的圖片,就讓人覺得可惜了。共聚焦基本都是全自動系統,可隨意定義照明區域、選擇多個熒光通路和設定定時取圖,所以,做Time-laps、FRAP和FRET有其獨到的優勢。另外,4Pi和STED又是其中的極品,具有超高的空間分辨率,只是使用不方便,未必適合做生物實驗。