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瞬時表達

鎖定
瞬時表達,即瞬時轉染後的初期,質粒DNA片段是遊離在細胞中的,能夠進行表達,稱為瞬時轉染表達。隨後,遊離在細胞中的質粒或DNA片段有兩種歸化,一種是被降解,還有一種是插入染色體中而能夠持續地穩定地表達。
中文名
瞬時表達
外文名
transient expression
名詞解釋
在載體選用方面,瞬時表達可以不需要篩選標籤,如常用的NEOG418等,但使用穩定表達的載體亦可以用來進行瞬時表達。
外源基因導入植物細胞中以後,其表達方式有瞬時表達(transient expression)和穩定表達(stable expression)兩種。在瞬時表達狀態的基因轉移中,引入細胞的外源DNA宿主細胞染色體DNA並不發生整合。這些DNA一般隨載體進入細胞後12小時內就可以表達,並持續約80小時左右。在穩定表達狀態的基因轉移中,導入宿主細胞的DNA整合到細胞染色體DNA上,以永久形式存在,並可傳給後代,形成穩定的轉化細胞基因的導入方法可分為間接轉基因方法和直接轉基因方法。
植物瞬時表達系統在啓動子分析基因功能分析和生產重組蛋白方面用途廣泛。並且具有如下優點:①簡單快速。轉化基因可在轉化的一週內進行分析,避免了組織培養等繁雜過程;②表達水平高。當單鏈的T-DNA進入植物細胞後,許多未整合到植物基因組中的遊離外源基因同樣可以表達。③安全有效。不受植物生長髮育過程的影響,不產生可遺傳的後代,結果可靠直觀,不存在基因漂移的風險。常用基因槍轉化和農桿菌真空滲透法