複製鏈接
請複製以下鏈接發送給好友

瞬時轉染

鎖定
瞬時轉染(transient transfection)是將DNA導入真核細胞的方式之一。在瞬時轉染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達。轉染的DNA不必整合到宿主染色體,可在比穩定轉染較短時間內收穫轉染的細胞,並對溶解產物中目的基因的表達進行檢測 [1] 
中文名
瞬時轉染
外文名
transient transfection
作    用
收穫轉染細胞,檢測目的基因表達
備    註
將DNA導入真核細胞的方式之一
特點
瞬時表達法具有很多優點: [1] 
瞬時轉染(transient transfection)是將DNA導入真核細胞的方式之一。在瞬時轉染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達。轉染的DNA不必整合到宿主染色體,可在比穩定轉染較短時間內收穫轉染的細胞,並對溶解產物中目的基因的表達進行檢測。
第一,操作簡易和週期短。傳統的穩定轉化系統,從轉化到獲得轉基因植株至少需要幾個月甚至更長的時間,且轉化效率比較低,瞬時表達系統僅需要2~4 周,避免了繁瑣的植物組織培養過程(Kapila et al., 1997);
第二,表達效率高。當單鏈的T-DNA 進入植物細胞後,不但轉化到植物基因組中的基因可以表達,許多未整合到植物基因組中的遊離外源基因同樣可以表達,拷貝數更高。其表達不受基因位置和基因沉默的影響,因而表達效率更高,可達穩定轉化表達量的數倍(Janssenand Gardner, 1990; Kapila et al., 1997; Yang et al.,2000; Wroblewski et al., 2005);
第三,安全高效。穩定表達轉基因植物存在食物鏈污染花粉傳播引起的基因漂移等轉基因安全問題(Twyan et al., 2003),瞬時表達中的基因轉移及其表達是一個獨立的過程,不產生可遺傳的後代,其生物安全性要高的多,且試驗結果更為直觀可靠;
第四,不需要篩選基因。穩定的轉基因轉化通常需要抗生素或其他篩選基因進行初步篩選,其轉基因植株也相對存在着轉基因安全問題,瞬時表達無需篩選基因,減少了轉基因中抗生素等帶來的不安全因素,同時載體可以更小,更容易轉化較大的目的片段和多個基因;
第五,能在完整植株上進行。在分析外源基因表達的互作與生物或非生物脅迫時,能夠更真實的反應植物體內的基因表達模式。 [2] 
參考資料
  • 1.    Joseph Sambrook, David W.Russell.分子克隆實驗指南.北京:科學出版社,2002:1272
  • 2.    邱礽,陶剛,李奇科,邱又彬,劉作易. 農桿菌滲入法介導的基因瞬時表達技術及應用[J]. 分子植物育種,2009,05:1032-1039.