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敏感菌株
鎖定
- 中文名
- 敏感菌株
- 試 劑
- 氯化鈉
- 培養基
- 營養瓊脂培養基
- 菌 種
- 藤黃微球菌等
敏感菌株試驗應用
在抗生素無菌檢查中選擇最合適的陽性對照菌,以保證無菌檢查方法的可行性。方法:採用中國藥典2000年版二部附錄XIH無菌檢查法項下無菌檢查法及薄膜過濾法,並用微量肉湯稀釋法做出現有陽性對照菌與NCCLS質控菌之間的關係。結果:根據抗生素對大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的MIC值的比較,選擇最敏感的菌作為該品種的陽性對照菌,並給出選擇陽性對照菌的依據。結論:為不同種類抗生素無菌檢查中陽性對照菌的選擇提供了參考依據,可明顯降低假陰性結果的產生,確保了檢驗方法的有效性和結果的準確性。
敏感菌株材料方法
1.1材料
1.1.1儀器
HTY-3型智能集菌儀(杭州泰林醫療器械廠)和一次性使用全封閉集菌培養器(杭州泰林醫療器械廠)規格KSF330。1.1.2試劑
氯化鈉(分析純,北京化學試劑公司,批號020910)。
1.1.3培養基
1.1.4菌種
藤黃微球菌CMCC(B)28001、生孢梭菌CMCC(B)64941、金黃色葡萄球CMCC(B)26003和ATCC25923、大腸埃希菌CMCC(B)44102和ATCC25922由中國醫學細菌保藏管理中心提供。
1.1.5供試品見表1。表1供試品種類、規格、批號及生產單位(略)
1.2試驗方法
1.2.1稀釋液及沖洗液製備
配製0.9%氯化鈉溶液,115℃,30min滅菌。
1.2.2培養基製備
中國藥典2000年版二部附錄XIH無菌檢查法項下培養基製備,115℃,30min滅菌。
1.2.3菌液準備
根據中國藥典2000年版二部附錄XIH無菌檢查法制備對照菌液,菌液濃度每1mL含10~100個菌(CFU)。同時做平板計數。
1.2.4供試品溶液的製備
1.2.5培養基靈敏度試驗
根據中國藥典2000年版二部附錄XIH無菌檢查法檢查培養基靈敏度檢查。
1.2.6抑細菌試驗
採用薄膜過濾法:取少量沖洗液打濕濾膜,將上述供試品溶液,全量通過一次性使用的全封閉集菌培養器的一個濾器。然後用0.9%無菌氯化鈉溶液50mL/次沖洗濾膜數次,每次均用力振搖,使可能附着在培養器壁上的抑菌成分沖掉,記錄所用的沖洗液總量。將滅菌的硫乙醇酸鹽液體培養基100mL加入集菌培養器內(該集菌培養濾桶為此次試驗的樣品管),該聯集菌培養器的餘下的濾桶依上述方法操作,作為平行樣品管。另取2聯濾器,分別加入滅菌的硫乙醇酸鹽液體培養基各100mL(該集菌培養濾桶稱為此次試驗的陽性管)。再取一單聯的濾器。過沖洗液300mL,加入滅菌的硫乙醇酸鹽液體培養基各100mL(該集菌培養濾桶稱為此次試驗的陰性管)。樣品管及陽性管均分別加入陽性對照菌液1mL。將上述各管濾桶置(32.5±2.5)℃培養箱培養,觀察結果。
1.2.7最低抑菌濃度(MIC)的測定
根據美國臨牀實驗室標準指南(NCCLS)[3]方法