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己糖激酶法
鎖定
己糖激酶是六碳糖的
磷酸化酶,催化使
葡萄糖從
穩定狀態變為活躍狀態,活化一個葡萄糖需要消耗1個
ATP,一個ATP放出一個
高能磷酸鍵,大約放出30.5kj
自由能,大部分變為熱量而散失,小部分使磷酸與葡萄糖結合生成葡萄糖-6-磷酸。
根據反應方程式,NADPH的生成速率與葡萄糖濃度呈
正比,在波長340nm監測
吸光度升高速率,計算血清中葡萄糖濃度。
[1]
- 中文名
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己糖激酶法
- 外文名
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hexokinase,HK
- 所屬學科
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化學
己糖激酶法過程
酶餛合試劑的成分與濃度
己糖激酶法
根據試劑盒説明書復溶後,混合配製成
酶試劑,置棕色瓶中放冰箱保存,約可穩定7天。
己糖激酶法
2.5mmol/L葡萄糖標準應用液
己糖激酶法
(1)主要參數 (2)加樣;37℃預温酶混合試劑1000μ1,加血清20μ1,立即吸入自動分析儀,監測吸光度升高速率(△A/min)。
(3)計算
己糖激酶法
2.
終點法測定:取16mmXl00mm試管,按下表編號與操作。
以上各管充分
混勻,在37℃
水浴,準確放置10min,
分光光度計波長340nm、比色杯光徑10mm,用
蒸餾水調零,分別讀取各管吸光度(Au、Ac、As、AB)。
計 算
空腹血清葡萄糖為3.89—6.1lm
mol/L(70一110mg/dl)。
己糖激酶法附註
2.雖然根據
NADPH的
摩爾吸光度可以直接計算血清葡萄糖濃度(如Boehringer、
Roche等試劑盒),但建議最好同時測定標準管和空白管(蒸餾水代替血清)。此時
計算公式應為:
- 參考資料
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1.
曹三成 .臨牀醫學檢驗手冊:天津出版傳媒集團天津科學技術出版社,2012