副溶血性弧菌

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus,VP）是一種嗜鹽性細菌。副溶血性弧菌食物中毒，是進食含有該菌的食物所致，主要來自海產品，如墨魚、海魚、海蝦、海蟹、海蜇，以及含鹽分較高的醃製食品，如鹹菜、醃肉等。本菌存活能力強，在抹布和砧板上能生存1個月以上，海水中可存活47天。臨牀上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要症狀。本病多在夏秋季發生於沿海地區，常造成集體發病。由於海鮮空運，內地城市病例也漸增多。

此菌對酸敏感，在普通食醋中5分鐘即可殺死；對熱的抵抗力也較弱。副溶血性弧菌食物中毒多發生在6~10月，海產品大量上市時。中毒食品主要是海產品，其次為鹹菜、熟肉類、禽肉、禽蛋類，約有半數中毒者為食用了醃製品後。中毒原因主要是烹調時未燒熟煮透或熟製品被污染。

副溶血弧菌系弧菌科弧菌屬，革蘭染色陰性，兼性厭氧菌，為多形態桿菌或稍彎曲弧菌。本菌嗜鹽畏酸。最適宜的培養基：温度為30℃—37℃，含鹽2.5%—3%(若鹽濃度低於0.5%則不生長），pH值為8.0—8.5。本菌對酸較敏感，當pH6以下即不能生長，在普通食醋中l一3min即死亡。在固體培養基上菌落常隆起，圓形，表面光滑，濕潤。在3%一3．5%含鹽水中繁殖迅速，每8～9min為一週期。對高温抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被殺死。本菌對常用消毒劑抵抗力很弱，可被低濃度的酚和煤酚皂溶液殺滅。

潛伏期自1小時至4天不等，多數為10小時左右。起病急驟，常有腹痛、腹瀉、嘔吐、失水、畏寒及發熱。腹痛多呈陣發性絞痛，常位於上腹部、臍周或回盲部。腹瀉每日3～20餘次不等，大便性狀多樣，多數為黃水樣或黃糊便。約2%～16%呈典型的血水或洗肉水樣便，部分病人的糞便可為膿血樣或粘液血樣，但很少有裏急後重。

由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表現為急發病，潛伏期2~24h，一般為10h發病。主要的症狀為腹痛，優勢腹痛在臍部附近劇烈。腹痛是本病的特點，多為陣發性絞痛，並有腹瀉、噁心、嘔吐、畏寒發熱，大便似水樣。便中混有黏液或膿血，部分病人有裏急後重，重症患者因脱水，使皮膚乾燥及血壓下降造成休克。少數病人可出現意識不清、痙攣、面色蒼白或發紺等現象，若搶救不及時，呈虛脱狀態，可導致死亡。

由於吐瀉，患者常有失水現象，重度失水者可伴聲啞和肌痙攣，個別病人血壓下降、面色蒼白或發紺以至意識不清。發熱一般不如菌痢嚴重，但失水則較菌痢多見。國內報道的副溶血弧菌食物中毒，臨牀表現不一，可呈典型、胃腸炎型、菌痢型、中毒性休克型或少見的慢性腸炎型型 ^[2]  。本病病程自1～6日不等，可自限，一般恢復較快。

預防措施與其他細菌所致者似。

1、動物性食品應煮熟煮透再吃。

2、隔餐的剩菜食前應充分加熱 ^[1]  。

3、防止生熟食物操作時交叉污染。

4、梭子蟹、蟛蜞、海蜇等水產品宜用飽和鹽不浸漬保藏（並可加醋調味殺菌），食前用冷開水反覆沖洗。

分佈極廣，主要分佈在海水和水產品中，我國華東地區沿岸的海水的副溶血性弧菌檢出率為47.5%~66.5%，海產魚蝦的平均帶菌率為45.6%~48.7%，夏季可高達90%以上。除了海產品以外，畜禽肉、鹹菜、鹹蛋、淡水魚等都發現有副溶血性弧菌的存在。

海水是本菌的污染源，海產品、海鹽、帶菌者等都有可能成為傳播本菌的途徑，另外有腸道病史的居民、漁民帶菌率偏高，也是傳染源之一。

預防措施包括：動物性食品應煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前應充分加熱；防止生熟食物操作時交叉污染；海產品宜用飽和鹽水浸漬保藏（並可加醋調味殺菌），食前用冷開水反覆沖洗。

吞服10萬個以上活菌即可發病，個別可呈敗血症表現。該菌有侵襲作用，其產生的TDH和TRH的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和腸毒素作用，可引致腸袢腫脹、充血和腸液瀦留，引起腹瀉。 TDH對心臟有特異性心臟毒，可引起心房纖維性顫動、期前收縮或心肌損害。有人發現脲酶病腹瀉有關。患者體質、免疫力不同，臨牀表現輕重不一，呈多型性。山區、內陸居民去沿海地區而感染者病情較重，臨牀表現典型；沿海地區發病者病情一般較輕。

1、傳染源傳染源為病人，集體發病時往往僅少數病情嚴重者住院，而多數未住院者可能成為傳染源，但由於病人僅在疾病初期排菌較多，其後排菌迅速減少，故不至因病人散佈病菌而造成廣泛流行。

2、傳播途徑本病經食物傳播，主要的食物是海產品或鹽醃漬品，常見者為蟹類、烏賊、海蜇、魚、黃泥螺等，其次為蛋品、肉類或蔬菜。進食肉類或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。

3、地區分佈特點：日本及我國沿海地區為副溶血性孤菌食物中毒發病率的高發區。據調查，我國沿海水域、海產品中副溶血性弧菌檢出率較高，尤其是氣温較高的夏秋季節。但近年來隨着海產食品的市場流通，內地也有副溶血性弧菌食物中毒的散在發生。

4、季節性特點及易感性：7～9月常是副溶血性弧菌食物中毒的高發季節。男女老幼均可患病，但以青壯年為多，病後免疫力不強，可重複感染。

5、食物的種類：主要是海產品，其中以墨魚、帶魚、蝦、蟹最為多見，如墨魚的帶菌率達93%，其次為鹽漬食品。食品中副溶血性弧菌的來源：人羣帶菌者對各種食品的直接污染。沿海地區飲食從業人員、健康人羣及漁民副溶血性弧菌帶菌率為11.7%左右，有腸道病史者帶菌率可達31.6～88.8%。間接污染，沿海地區炊具的副溶血性弧菌帶菌率為61.9%，被副溶血性弧菌污染的食物，在較高温度下存放，食用前加熱不徹底或者生吃，或熟製品受到帶菌者、帶菌的生食品、帶菌容器及工具等的污染 ^[2]  。

用於檢測V．p的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR，Ap-PCR)、針對任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、實時PCR(Real-timePCR)。 1、任意引物PCRMatsumoto等採用任意引物PCR對V．p進行檢測。他們針對V。p的tdh基因和trh基因一段特異的序列，設計兩條引物，

引物1：5--GGTGCGGGAA--3，

引物2：5一GTTTCGCTCC一3，

對1977～1998年所收集的227株V．p進行PCR。通過電泳分析發現，1996-1998年收集的22株血清型為03：K6菌株與1996年以前收集的03：K6血清型菌株基因序列有所不同，為03；K6血清型新出現的變異株，並最初出現在孟加拉國。這是目前最簡單的以基因為基礎的細菌亞分型方法。

2、針對任意引物PCR由於臨牀分離株絕大多數含有tdh基因，因此絕大部分研究者都根據tdh設計引物進行特異擴增。1993年，Lee等根據tdh基因設計引物，對36株TDH+株、89株TDH-株以及46株其他弧菌和腸道菌進行PCR檢測。結果顯示，36株TDH+株全部特異擴增出來，其餘菌株都沒有擴增；而檢測靈敏度高，最低檢測量可至40pgDNA，並可直接檢測糞便標本，無需分離培養，方便快速。1999年，Kim等選擇toxR基因序列設計兩對引物，5’--GTCTTCTGACGCAATCGTTG--3和5’一ATACGAGTGGTTGCTGTCATG一3’，對14株V．p、14株其他弧菌進行PCR。結果顯示，14株V．p都得到一條368bp的特異擴增亮帶，而其他菌株沒有特異擴增。此外，Venkateswaran等選擇gyrB基因設計引物對V·p進行PCR、Cordova等選擇pR72H基因設計引物進行PCR，特異性、靈敏度都很好。

3、多重PCR由於不是全部副溶血性弧菌都含；tdh基因或，trh。基因，所以只針對tdh或trh的單一PCR，有時會漏檢。多重PCR(multiplex-PCR)能全方位高效率地檢測Vpo1994年，Bej白等針對“、tdh、trh設計不同的引物對，在同一PCR反應體系內同時擴增tl、tdh、trh。結果顯示，所有的V。p都擴增出“基因，tl基因是V．p特異的；54%的V．p擴增出tdh基因；只有38．73%的V．p擴增出trh基因；該法靈敏度高，能把log牡蠣培養肉湯裏10～100個V．p檢測出來。與其他常規生化方法相比，多重PCR更快速，僅8h就能完成檢測，結果更為準確、可靠，而且還可改進成定量競爭PCR，對標本中靶序列進行定量。

4、實時PCR常規PCR檢測，需要從反應體系中吸取產物做電泳或Southern雜交等試驗進行鑑定，轉移過程中易污染，造成假陽性，而且耗費時間。1996年，Tyagi開創了一種實時PCR(Real-timePCP,)。實時PCR是在，PCR反應體系中加入標記有報告基團和淬滅基團的線性Taqman。探針或莖環型熒光分子信標探針，在墓因擴增過程中，與產物雜交，此時，報告基團和淬滅基團分開，根據能量共振轉移現象，報告基團發出熒光而被檢測。這種方法操作簡單，閉管檢測，減少污染，靈敏度高，並且可以在PCR結束或PCR過程進行同步定性或定量檢測，面且可以進行臨牀大規模快速檢測。

1、支持及對症治療 脱水者需輸入生理鹽水及葡萄鹽水，或口服補液鹽，以糾正失水。血壓下降者，除被動補充血容量，糾正酸中毒等外，可酌用血管活性藥。

2、抗菌藥物 輕度患者可不用抗菌藥物，較重者可給複方新諾明或慶大黴素、阿米卡星和諾氟沙星等喹諾酮類抗菌藥物【上述抗生素類可能使細菌產生耐藥性，使用須謹慎】。

3、發生中毒後要立即停止食用可疑中毒食品，併到醫院醫治。副溶血性弧菌對氯黴素敏感。嘔吐、腹瀉嚴重者要補充水和鹽。

加工海產品的案板上副溶血弧菌的檢出率為87.9%。因此，對加工海產品的器具必須嚴格清洗、消毒。海產品一定要燒熟煮透，加工過程中生熟用具要分開。烹調和調製海產品拼盤時可加適量食醋。食品燒熟至食用的放置時間不要超過4個小時。主要病理變化為空腸及迴腸有輕度糜爛，胃粘膜炎、內臟（肝、脾、肺）淤血等。

輔助檢查

1、白細胞計數總數多在1萬mm3以上，中性粒細胞偏高。

2、便檢查鏡檢可見白細胞或膿細胞，常伴有紅細胞，易被誤診為菌痢。糞便培養可檢出副溶血弧菌，絕大多數迅速轉陰，僅少數持續陽性2～4天。