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TE緩衝液

鎖定
TE緩衝液是由TrisEDTA配製而成,主要用於溶解核酸,能穩定儲存DNARNA。TE緩衝液是一種能在加入少量酸或鹼時抵抗pH改變的溶液。
PH緩衝系統對維持生物的正常pH值,正常生理環境起重要作用。多數細胞僅能在很窄的pH範圍內進行活動,而且需要有緩衝體系來抵抗在代謝過程中出現的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩衝體系,它們是蛋白質重碳酸鹽緩衝體系和磷酸鹽緩衝體系。每種緩衝體系所佔的分量在各類細胞和器官中是不同的。
在生化研究工作中,常常要用到緩衝溶液來維持實驗體系的酸鹼度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效。如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大,會使酶活性下降甚至完全失活。所以我們要學會配製緩衝溶液。
弱酸及其鹽組合一起使具有緩衝作用。生化實驗室常常用的緩衝系主要有磷酸檸檬酸碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統,在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩衝體系,因為有時影響實驗結果的因素並不是緩衝液的pH值,而是緩衝液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷緩衝劑都可能產生不需要的反應。
中文名
TE緩衝液
外文名
Tris-EDTA buffer solution
結    構
由Tris和EDTA配製而成
作    用
用於溶解DNA,能穩定儲存DNA
硼酸鹽
硼酸鹽與許多化合物形成複鹽、如蔗糖
檸檬酸鹽
檸檬酸鹽離子容易與鈣結合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用
磷酸鹽
在有些實驗,它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉澱出來。而且它在pH7.5以上時緩衝能力很小

TE緩衝液三羥甲基氨基甲烷

它可以和重金屬一起作用,但在有些系統中也起抑止的作用。其主要缺點是温度效應,這點往往被忽視。在室温pH是7.8的Tris一緩衝液,在4℃時是8.4,在37℃時是7.4,因此,4℃配製的緩衝液拿到37℃測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,緩衝能力差。

TE緩衝液配製

1×TE Buffer
組成濃度:10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0
配製量:500ml
配製方法:量取下列溶液於500ml燒杯中
1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml
0.5M EDTA PH=8.0 1ml
向燒杯中加入約400mldd H2O均勻混合;將溶液定容到500ml後,高温高壓滅菌;室温保存.

TE緩衝液作用及用途

TE緩衝液作用

TE緩衝液是弱鹼性,對DNA的鹼基有保護性,(DNA在TE中的穩定性較好,不易被破壞其完整性或產生開環及斷裂),包括提取好的DNA也要放在TE緩衝液中保存.

TE緩衝液用途

TE緩衝液Tris +EDTA緩衝液,這種緩衝液我們一般用作溶解劑或保持劑,主要是調控PHTAE是一種電泳緩衝液,主要用於DNA分子的電泳。 TE組成濃度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0 配製量:500ml 配製方法:量取下列溶液於500ml燒杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向燒杯中加入約400mldd H2O均勻混合;將溶液定容到500ml後,高温高壓滅菌;室温保存.
TAE是使用最廣泛的緩衝系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大於實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩衝液快約10%,電泳大於13kb的片段時用TAE緩衝液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩衝系統進行電泳。TAE的缺點是緩衝容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環裝置使兩極的緩衝液得到交換。 50×TAE Buffer 配製方法: 1. 稱量Tris 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 於1L燒杯中; 2.向燒杯中加入約800ml去離子水,充分攪拌均勻; 3加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4.加去離子水定容至1L後,室温保存。