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TAE緩衝液
鎖定
TAE緩衝液(TAE Buffer)是由三羥甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)組成的緩衝液,英文名為三種組成成分的首字母。在分子生物學實驗中常被用作DNA或RNA進行凝膠電泳時的緩衝液。是使溶液具有一定的導電性,以利於DNA分子的遷移,例如,一般電泳緩衝液中應含有0.01-0.04 mol/L的Na+離子,Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢;太高時就會造成過大的電流使膠發熱甚至熔化。電泳緩衝液還有一個組分是EDTA,加入濃度為1-2 mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等離子,防止電泳時激活 DNA酶,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉澱。
- 中文名
- TAE緩衝液
- 外文名
- TAE Buffer
- 作 用
- 維持合適的pH
- 氧化反應
- (4OH--4e-=2H2O+O2)
- 還原反應
- (4H++4e-=2H2)
TAE緩衝液產品介紹
TAE是使用最廣泛的緩衝系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大於實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種(TBE和TPE)緩衝液快約10%,電泳大於13 kb的片段時用TAE緩衝液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩衝系統進行電泳。TAE的缺點是緩衝容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環裝置使兩極的緩衝液得到交換。
TAE緩衝液TAE的配方
50×TAE Buffer 配製方法:
- 稱量Tris 242 g,Na2EDTA·2H2O 37.2 g於1 L燒杯中;
- 向燒杯中加入約600 ml去離子水,充分攪拌溶解;
- 加入57.1 ml的冰乙酸,充分攪拌;
- 加去離子水定容至1 L後,室温保存。
TAE緩衝液TBE與TPE
TBE的特點是緩衝能力強,長時間電泳時可選用TBE,並且當用於電泳小於1kb的片段時分離效果更好。TBE用於瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用,並且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結合的四羥基硼酸鹽複合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收電泳中使用。
- 參考資料
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- 1. 1×TAE緩衝液的配製方法 - 實驗方法 - 丁香通 .丁香通[引用日期2022-08-11]