農桿菌介導法

轉基因技術的飛速發展為生物定向改良和分子育種提供了一種較佳的方法，並使其成為基因工程和育種的最有效途徑，應用較廣泛的轉基因技術有農桿菌介導法、花粉通道法、顯微注射法、基因槍法、離子束介導法等等，其中農桿菌介導法以其費用低、拷貝數低、重複性好、基因沉默現象少、轉育週期短及能轉化較大片段等獨特優點而備受科學工作者的青睞。農桿菌介導法主要以植物的分生組織和生殖器官作為外源基因導入的受體，通過真空滲透法、浸蘸法及注射法等方法使農桿菌與受體材料接觸，以完成可遺傳細胞的轉化，然後利用組織培養的方法培育出轉基因植株，並通過抗生素篩選和分子檢測鑑定轉基因植株後代。

根癌農桿菌的Ti質粒上有一段轉移DNA（T-DNA），具有向植物細胞傳遞外源基因的能力，而細菌本身並不進入受體細胞。農桿菌轉化植物細胞涉及一系列複雜的反應，主要包括：①受傷的植物細胞為修復創傷部位，釋放一些糖類、酚類等信號分子。

②在信號分子的誘導下，農桿菌向受傷組織集中，並吸附在細胞表面。

③轉移DNA上的毒粒基因被激活並表達，同時形成轉移DNA的中間體。

④轉移DNA進入植物細胞，並整合到植物細胞基因組中。因為單子葉植物不是農桿菌的天然寄主，況且其不能合成起誘導作用的信號分子，所以限制了農桿菌介導法在單子葉植物中的應用。不過近年來大量成功轉化的實例表明，植物、真菌、哺乳動物甚至人類細胞都可以作為農桿菌的受體