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紅細胞裂解液
鎖定
- 中文名
- 紅細胞裂解液
- 外文名
- Red Blood Cell Lysis Buffer
- 類 型
- 去除紅細胞最簡便易行的方法
- 用 途
- 經酶消化分散組織細胞的分離純化
紅細胞裂解液保存條件
2-8℃保存。
紅細胞裂解液配方
Reagent | Quantity (for 1000 mL) | Final concentration |
---|---|---|
NH4Cl | 8.02 g | 150 mm |
KHCO3 | 1 g | 10 mm |
Na2EDTA | 37.2 mg | 0.1 mm |
Dissolve all reagents in 850 mL of H2O. Adjust the pH to 7.2–7.4, and add H2O to 1000 mL. Store for up to 6 mo |
紅細胞裂解液使用説明
組織細胞樣品:
2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向細胞沉澱中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入3-5ml裂解液),輕輕吹打混勻;
3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;
4.收集沉澱部分,加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次;
5.如裂解不完全可重複步驟2和3;
血細胞:
1.新鮮抗凝血,離心棄去上清液;
2.取出4℃冰箱預冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向細胞沉澱中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入6-10ml裂解液),輕輕吹打混勻;
3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;
4.收集沉澱部分,加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次;
5.如裂解不完全可重複步驟2和3;
6.重懸細胞,用於後續實驗;如提取RNA,最好是於步驟4開始使用DEPC水配製的溶液進行。
紅細胞裂解液作用原理
- 參考資料
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- 1. ACK Lysis Buffer .Cold spring Harbor protocol.2014-04-10[引用日期2020-09-16]
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