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塗布平板法
鎖定
- 中文名
- 塗布平板法
- 外文名
- spread plate method
- 應 用
- 微生物學實驗
塗布平板法方法特徵
稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落,即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特徵設計的計數方法,即一個菌落代表一個單細胞。計數時,首先將待測樣品製成均勻的系列稀釋液,儘量使樣品中的微生物細胞分散開,使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分佈於平板中的培養基內。經培養後,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可計算出樣品中的含菌數。此法所計算的菌數是培養基上長出來的菌落數,故又稱活菌計數。一般用於某些成品檢定(如殺蟲菌劑等)、生物製品檢驗、土壤含菌量測定及食品、水源的污染程度的檢驗。
塗布平板法實驗原理
塗布平板法實驗器材
1.活材料:蘇雲金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)菌劑。
塗布平板法實驗方法
(提示:10-1為10的負一次方,即0.1;10-2為10的負二次方,即0.01)
第一步:系列稀釋
樣品稀釋液的製備 準確稱取待測樣品10g,放入裝有90ml無菌水並放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置搖牀上振盪20min,使微生物細胞分散,靜置20-30s,即成10-1稀釋液;再用1ml無菌吸管,吸取10-1稀釋液lml,移入裝有9ml無菌水的試管中,吹吸3次,讓菌液混合均勻,即成10-2稀釋液;再換一支無菌吸管吸取10-2稀釋液1ml,移入裝有9ml無菌水的試管中,也吹吸三次,即成l0-3稀釋液;以此類推,連續稀釋,製成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀釋菌液。
用稀釋平板計數時,待測菌稀釋度的選擇應根據樣品確定。樣品中所含待測菌的數量多時,稀釋度應高,反之則低。通常測定細菌菌劑含菌數時,採用10-7、10-8、10-9稀釋度,測定土壤細菌數量時,採用10-4、10-5、10-6稀釋度,測定放線菌數量時,採用l0-3、10-4、10-5稀釋度,測定真菌數量時,採用10-2、10-3、10-4稀釋度。
第二步:塗布平板