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菌落

鎖定
菌落,是指由單個或少數微生物細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度,形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態、構造等特徵的子細胞集團。
通常是細菌在固體培養基上(內)生長髮育,形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態、構造等特徵的子細胞的集團,稱之為菌落。
中文名
菌落
外文名
colony
介    紹
細菌圍繞母細胞形成的子細胞集團
環    境
固體培養基上(內)
形態包括
大小、形狀、邊緣、光澤等

菌落簡介

菌落,亦稱集落。一定種的單個菌體或孢子在一定的固體培養基上生長繁殖後形成的肉眼可見的微生物聚集體。 [1] 
在培養基表面生長的菌落,叫表面菌落;在表面下生長的菌落,叫埋藏或深層菌落。不同的微生物形成的菌落有不同的特徵,是鑑定菌種的重要標誌。
各種微生物在一定條件下形成的菌落特徵,如大小、形狀、邊緣、表面、質地、顏色等,具有一定的穩定性,是衡量菌種純度、辨認和鑑定菌種的重要依據。菌落特徵與微生物的菌體形態結構特徵密切相關。例如,細菌、酵母菌不形成菌絲,其菌落僅生長在固體培養基表面,與培養基結合不緊密,可用接種工具將其全部挑起;而放線菌、黴菌的菌體大多分化為營養菌絲與繁殖菌絲,營養菌絲深入培養基中吸取營養,具有與培養基結合較緊,不易挑起等特徵。

菌落形態特徵

菌落形態包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質地、顏色和透明程度等。每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特徵。不同種或同種在不同的培養條件下,菌落特徵是不同的。這些特徵對菌種識別、鑑定有一定意義。
細胞形態是菌落形態的基礎,菌落形態是細胞形態在羣體集聚時的反映。細菌是原核微生物,故形成的菌落也小;細菌個體之間充滿着水分,所以整個菌落顯得濕潤,易被接種環挑起;球菌形成隆起的菌落;有鞭毛細菌常形成邊緣不規則的菌落;具有莢膜的菌落表面較透明,邊緣光滑整齊;有芽孢的菌落表面乾燥皺褶;有些能產生色素的細菌菌落還顯出鮮豔的顏色。 [2] 
菌落形態比較
比較項目
細菌
放線菌
真菌
酵母菌
黴菌
菌落特徵
形態圓形或不規則;表面光滑或皺褶;常見為灰白色、乳白色;濕潤黏稠。
表面呈乾燥、細緻的粉末狀或茸毛狀。
頗似細菌的菌落,但不及細菌菌落濕潤與黏稠,多為乳白色,一般為圓形,表面光滑。
與放線菌相比,表面呈毛狀或棉絮狀,如呈粉末狀者則不及放線菌細膩緻密。
菌落在培養基上着生情況
用接種環易從基質表面颳去菌落。
用接種環易颳去其粉末或茸毛,但留下的部分緊密堅實、不易用接種環颳去。
與細菌相似。
與放線菌相比,用接種環刮取後,基質中沒有留下明顯的緊密堅實的圓形,基質菌絲狀。
菌落生物過程
從開始形成到成熟期間的主要變化為增大、增厚或顏色加深。
起初在基質中出現緊密、堅實的基質菌絲,菌落隨後發展為細緻茸毛或粉末狀的氣生菌絲及孢子絲,並出現不同顏色。
與細菌相似。
起初在基質上形成白色或無色的絨毛狀或棉絮狀菌落,隨後形成孢子。
可能的氣味
臭味
土腥味
酒香味
黴味 [4] 
大腸桿菌在去氧膽酸鹽瓊脂上的形態 大腸桿菌在去氧膽酸鹽瓊脂上的形態
大腸桿菌在普通瓊脂培養基上面都是一樣的,圓形邊緣整齊,表面光滑,半透明,小凸起;典型的大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂平板上的特徵為:深紫黑色、光滑、濕潤、帶有金屬光澤的圓形菌落。

菌落培養

菌落操作方法

根據標準要求或對污染情況的估計,選擇2~3個適宜稀釋度,分別在制10倍遞增稀釋的同時,以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液於滅菌平皿中,每個稀釋度做兩個平皿。將涼至46℃營養瓊脂培養基注入平皿約15ml,並轉動平皿,混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內作空白對照。待瓊脂凝固後,翻轉平板,置36±1℃温箱內培養48±2h,取出計算平板內菌落數目,乘以稀釋倍數,即得每克(每毫升)樣品所含菌落總數 [3] 

菌落操作要點

1.傾注用培養基應在46℃水浴內保温,温度過高會影響細菌生長,過低瓊脂易於凝因而不能與菌液充分混勻。如無水浴,應以皮膚感受較熱而不燙為宜。傾注培養基的量規定不一,從12~20ml不等,一般以15ml較為適宜,平板過厚可影響觀察,太薄又易於乾裂。傾注時,培基底部如有沉澱物,應將底部棄去,以免與菌落混淆而影響計數觀察。
2.為使菌落能在平板上均勻分佈,檢液加入平皿後,應儘快傾注培養基並旋轉混勻,可正反兩個方向旋轉,檢樣從開始稀釋到傾注最後一個平皿所用時間不宜超過20min,以防止細菌有所死亡或繁殖。
3.培養温度一般為37℃(水產品的培養温度,由於其生活環境水温較低,故多采用30℃)。培養時間一般為48h,有些方法只要求24h的培養即可計數。培養箱應保持一定的濕度,瓊脂平板培養48h後,培養基失重不應超過15%。
4.為避免食品中的微小顆粒或培基中的雜質與細菌菌落發生混淆,不易分辨,可同時作一稀釋液與瓊脂培基混合的平板,不經培養,而於4℃環境中放置,以便計數時作對照觀察。在某些場合,為了防止食品顆粒與菌落混淆不清,可在營養瓊脂中加入氯化三苯四氮唑(TTC),培養後菌落呈紅色,易於分別。

菌落注意事項

1. 操作要快而準,包括材料、加樣、倒培養基。
2. 吸液體時液體不能進入吸頭。
3. 樣品稀釋時一定要混勻。
4. 倒培養基前,瓶口要過火焰。
5. 一定要有空白對照。
6. 培養基温度控制,培養基薄厚。
7. 檢測時一定要使平皿完全暴露於空氣中。
參考資料
  • 1.    糧食大辭典編輯委員會編,糧食大辭典,中國物資出版社,2009.12,第263頁
  • 2.    郭小兵,陸曉霞主編,臨牀微生物學檢驗實驗指導,鄭州大學出版社,2017.01,第12頁
  • 3.    劉碩,楊旭,張栩嘉,自然地理與資源環境專業實驗教程,哈爾濱工程大學出版社,2016.07,第76頁
  • 4.    吳敏,黃愛軍.生命科學導論實驗(第3版)[M].北京:高等教育出版社.2021:24.