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hat培養基

鎖定
1964年Littlefield首先發明瞭HAT(H—Hypoxanthine次黃嘌呤,A—Aminopterin氨基蝶呤,T——Thymidine 胸腺嘧啶核苷)培養基的選擇培養
中文名
HAT培養基
發明時間
1964年
發明者
Littlefield
分    類
選擇性培養基
釋義
缺失這兩種酶之一的細胞,在HAT培養基中,應該不能生存,只有發生融合或者其他情況下,才能使細胞重新獲得用旁路途徑進行DNA合成能力。
HAT培養基也就是指含有這三種物質的細胞培養基。對£具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在細胞內具有起始合成途徑(denovopathway)和中間合成途徑(salvagepathway)。中間合成途徑包括:通過HGPRT催化作用把次黃嘌呤轉化成次黃嘌呤核苷-磷酸(IMP),通過TK的催化把胸腺嘧啶核苷轉化成脱氧胸腺嘧啶核苷-磷酸(dTMP),再進一步合成核酸。由於氨基蝶呤可阻礙起始合成途徑,所以培養基中含有它時,細胞便只有中間合成途徑,所以必須供給核苷酸。至於缺失中間合成途徑的細胞,可失去增殖能力臻於死亡。根據這一點,不僅把混存於細胞羣中的正常細胞,通過試管內培養進行選擇,例如嘌呤的中間合成途徑缺失株和嘧啶的中間合成途徑缺失株,由於可以互補,所以兩者的雜種細胞,即使在氨基蝶呤的存在條件下也可以增殖。在這種情況下,利用HAT培養基可對雜種細胞進行選擇。次黃嘌呤胸腺嘧啶脱氧核苷可作為中間合成途徑的原料而進行添加。