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基因工程的基本操作程序
鎖定
基因工程的基本操作程序指的是生物基因工程技術中的一種操作的程序。
基因工程的基本操作程序目標獲取
基因工程的基本操作程序從基因文庫中獲取
基因工程的基本操作程序利用PCR技術擴增目的基因
②PCR原理：DNA雙鏈複製。
⑤結果：每次循環後的目的基因的量增加一倍，即成指數形式擴增。
基因工程的基本操作程序人工合成
如果基因較小，核苷酸序列又已知，可以通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成。
基因工程的基本操作程序技術比較
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場所 | 生物體外 | 細胞內 | |
酶 | |||
載體 | 不需要 | 不需要 | 需要 |
遵循原則 | 鹼基互補配對 | 鹼基互補配對 | |
結果 | DNA分子 | DNA分子片段 | DNA分子片段 |
基因工程的基本操作程序載體構建
基因工程的基本操作程序組成
基因工程的基本操作程序功能
1、使目的基因在受體細胞中穩定存在，並且可以遺傳給下一代；2、使目的基因能夠表達和發揮作用。
基因工程的基本操作程序步驟
⑵、用同種限制酶切割目的基因，產生相同的黏性末端。
⑷、基因表達載體的構成：目的基因+啓動子+終止子+標記基因
基因工程的基本操作程序目標導入
基因工程的基本操作程序轉化
目的基因進入受體細胞內，並且在受體細胞內維持穩定和表達的過程。
基因工程的基本操作程序受體種類
⑴、微生物：細菌細胞
⑶、動物細胞：受精卵、胚胎細胞
基因工程的基本操作程序導入方法
⑴、微生物：感受態細胞法
②、過程：CaCl2處理細胞 → 感受態細胞 → 表達載體與感受態細胞混合 → 感受態細胞吸收DNA分子。
③、過程：目的基因插入T_DNA，T_DNA進入農桿菌，將農桿菌導入植物細胞。
⑶、動物細胞：顯微注射法
①、目的基因表達載體經過提純備用，取得受體動物的卵（或受精卵）備用。
②、採用顯微注射技術將目的基因表達載體注射到卵（或受精卵）中。
③、培養液培養成為早期胚胎。
④、將早期胚胎移植到雌性動物子宮內，發育成新個體。
基因工程的基本操作程序檢測鑑定
⑴、檢測：
①、導入檢測：檢測受體細胞染色體DNA上是否含有目的基因。
DNA分子雜交法（DNA探針法）。
②、表達檢測：檢測目的基因是否完成轉錄出mRNA。
檢測目的基因是否完成表達翻譯成蛋白質。
提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。
⑵、鑑定：個體生物學水平鑑定，鑑定抗性等。
參考：
- 參考資料
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- 1. 基因工程基本操作步驟 ．江蘇省木瀆高級中學[引用日期2015-10-14]
