分子生物學實驗

《分子生物學實驗》主要介紹分子生物學的基本操作技術與實驗手段，主要包括植物、動物、微生物基因組DNA的提取與鑑定，哺乳動物組織總RNA的提取與鑑定，質粒DNA的提取與鑑定，PCR擴增，分子雜交技術，限制性內切酶消化，分子克隆全過程和基因文庫的構建等實驗項目的原理及步驟。《分子生物學實驗》是一本既具有一定的理論體系，又具有通用性和指導性作用的教學用書。《分子生物學實驗》主要面向高等院校，特別是應用型本科院校生物科學、生物工程等相關專業的學生及分子生物學初級研究者。 ^[1] 

第1章 分子生物學實驗室規範及注意事項

1.1 分子生物學實驗室常用儀器設備

1.2 分子生物學實驗室操作規範

1.3 分子生物學實驗注意事項

第2章 常用的檢測分析方法

2.1 分光光度法

2.2 電泳

實驗1 DNA濃度與純度的紫外分光光度法分析

實驗2 DNA的瓊脂糖凝膠電泳

實驗3 DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳

第3章 植物基因組DNA的提取及鑑定

3.1 植物基因組DNA

3.2 植物基因組DNA的提取技術

實驗4 改進SDS法提取植物基因組DNA

實驗5 CTAB法提取植物基因組DNA

第4章 動物基因組DNA的提取及鑑定

4.1 動物基因組DNA

4.2 動物基因組DNA、的提取技術

實驗6 動物組織基因組DNA的提取

實驗7 血液基因組DNA的提取

第5章 微生物基因組DNA的提取及鑑定

5.1 微生物基因組DNA

5.2 微生物基因組DNA的提取技術

實驗8 大腸桿菌基因組DNA的提取

實驗9 酵母基因組DNA的提取

實驗10 環境微生物基因組DNA的提取

第6章 質粒DNA的提取及鑑定

6.1 質粒

6.2 大腸桿菌質粒DNA的提取技術

實驗11 鹼裂解法小量製備質粒DNA

實驗12 試劑盒抽提大腸桿菌質粒

實驗13 質粒DNA的大量製備

第7章 哺乳動物組織總RNA的提取及鑑定

7.1 哺乳動物組織總RNA

7.2 哺乳動物組織總RNA的提取技術

7.3 總RNA提取中的關鍵問題

實驗14 哺乳動物組織總RNA的提取

第8章 PCR基因擴增及檢測

8.1 PCR技術的原理

8.2 PCR技術的發展歷程

8.3 PCR技術的種類

實驗15 綠色熒光蛋白基因的PCR擴增

實驗16 乳鐵蛋白基因的PCR擴增

實驗17 查爾酮合成酶基因的PCR擴增

實驗18 逆轉錄PCR擴增

第9章 分子雜交

9.1 分子雜交的原理

9.2 分子雜交的發展歷程

9.3 分子雜交的種類

實驗19 Southern雜交

實驗20 Northern雜交

實驗21 Western雜交

第10章 限制性內切酶消化

10.1 限制性內切酶的發現

10.2 限制性內切酶的命名及種類

10.3 限制性內切酶的反應體系

10.4 限制性內切酶酶切圖譜

實驗22 質粒的限制性內切酶消化

實驗23 λDNA的限制性內切酶消化

第11章 目的基因的分離純化

實驗24 乙醇沉澱法純化PCR擴增產物

實驗25 硅膠膜吸附法純化PCR擴增產物

實驗26 外源DNA的瓊脂糖凝膠電泳回收

第12章 DNA的體外重組

12.1 常用的載體

12.2 外源DNA與載體的連接方法

實驗27 PCR產物直接克隆

實驗28 黏性末端的連接

第13章 感受態細胞的製備及轉化

13.1 轉化

13.2 感受態細胞的製備方法

實驗29 大腸桿菌感受態細胞的製備及轉化

實驗30 重組DNA的藍白斑篩選

第14章 外源基因的誘導表達

14.1 表達系統

14.2 表達載體

14.3 外源基因誘導表達的優化

實驗31 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達

實驗32 蛋白質的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

第15章 基因文庫的構建

15.1 基因文庫的構建方法

15.2 基因文庫的應用

實驗33 植物cDNA文庫的構建

附錄 常用試劑母液配製表