VP試驗

1.葡萄糖蛋白腖水培養基成分：多價蛋白腖7g、葡萄糖5g、磷酸氫二鉀5g、蒸餾水1000ml，pH 7.2。

2.製備：將上述成分混合溶解後，分裝於小試管，115℃高壓滅菌15 min。

3.試劑：甲液為6%a萘酚乙醇溶液；乙液為40%氫氧化鉀溶液。

1.O’Meara氏法：將試驗菌接種於通用培養基，於36±1°C培養48h，培養液1ml加O’Meara試劑（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氫氧化鈉水溶液）1ml，搖動試管1~2min，靜置於室温或36±1°C恆温箱，若4h內不呈現伊紅、即判定為陰性。亦有主張在48~50°C水浴放置2h後判定結果者。

2.Barritt氏法：將試驗菌接種於通用培養基，於36±1°C培養4天、培養液2.5ml先加入5°Cα萘酚（2-na-phthol）純酒精溶液0.6ml，再加40%氫氧化鉀水溶液0.2ml，搖動2~5min，陽性菌常立即呈現紅色，若無紅色出現，靜置於室温或36±1°C恆温箱，如2h內仍不顯現紅色、可判定為陰性。

3.快速法：將0.5%肌酸溶液2滴放於小試管中、挑取產酸反應的三糖鐵瓊脂斜面培養物一接種環，乳化接種於其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氫氧化鈉水溶液2滴，振動後放置5min，判定結果。不產酸的培養物不能使用。

大腸埃希菌ATCC 25922為無紅色出現，肺炎克雷伯菌ATCC 13883為紅色 ^[1]  。

呈紅色者為陽性 ^[1]  。

1.許多實驗室工作人員有一個錯誤的印象，即VP試驗陽性菌甲基紅試驗自然是陰性，或反之亦然。實際上，腸桿菌科的大多數細菌產生相反的反應（由於乙酰甲基甲醇形成鹼性，導致甲基紅試驗陰性和VP試驗陽性）。某些細菌如蜂房哈夫尼菌和奇異變形桿菌35℃培養可產生甲基紅試驗和VP試驗同時陽性反應，後者常延遲出現。

2.a萘酚乙醇溶液易失效，試劑放室温Ⅱ音處可保存1個月。氫氧化鉀溶液可長期保存。國內多采用貝氏法 ^[1]  。

本試驗常與甲基紅試驗一起使用，因為前者為陽性的細菌，後者通常為陰性，反之亦大腸埃希菌、沙門菌等甲基紅試驗呈陽性反應，而VP試驗則為陰性；相反，如沙雷菌、陰VP試驗陽性，而甲基紅試驗為陰性 ^[1]  。