-
LB培養基
鎖定
- 中文名
- LB培養基
- 外文名
- LB Culture
- 來源於
- lysogeny broth,即溶菌肉湯
- 發明人
- 貝爾塔尼(Bertani)
- 全 稱
- Luria-Bertani培養基
- 分 類
- 液態培養基、固態培養基
- 成 分
- 胰化蛋白腖,NaCl ,酵母膏,水
- 條 件
- pH7.4
LB培養基簡介
肉膏蛋白腖培養基是一種廣泛用於培養細菌的培養基。而LB培養基則是一種近年來用於培養基因工程受體菌(大腸桿菌)的常用培養基。兩者都屬於半合成培養基。肉膏蛋白腖的培養基主要成分是牛肉膏、蛋白腖和NaCl。而LB培養基的主要成分是胰蛋白腖、酵母提取物和NaCl。高氏合成一號培養基是一種用於培養放線菌的合成培養基。培養基中的可溶性澱粉作為碳源和能源
[1]
。
LB培養基分類
LB培養基液態培養基
胰蛋白腖10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
搖動容器直至溶質溶解.用5mol/LNaOH調pH至7.0.用去離子水定容至1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.
培養的菌種一般是經過改造的無法在外界環境單獨存活和擴增的工程菌.通過培養工程菌,我們可以表達大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質粒,工程菌的有效擴增是生化分子實驗的基礎.
LB培養基的配方如下:
胰蛋白腖(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化鈉(NaCl) 10g/L
另外根據經驗值用NaOH調節該培養基的pH,使其達到7.4(該pH適合使用最廣的原核表達菌種E.coli的生長)
LB培養基固態培養基
LB固體培養基1L和液體一樣,加15g~20g瓊脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,並且倒好板。
LB培養基倒板
1.配製:100mlLB培養基加入1~1.5g瓊脂粉
2.抗生素的加入:高壓滅菌後,將融化的LB固體培養基置於55℃的水浴中,待培養基温度降到55℃時(手可觸摸)加入抗生素,以免温度過高導致抗生素失效,並充分搖勻。
3.倒板:一般15ml-20ml倒1個板子。培養基倒入培養皿後,打開蓋子,在紫外下照10-15分鐘。
4.保存:用封口膠封邊,並倒置放於4℃保存,一個月內使用。
ph值需要控制在7.4