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甲酸脱氫酶
鎖定
甲酸脱氫酶,在甘油
厭氧發酵生產1,3-丙二醇的過程中,需要消耗
還原當量NADH,NADH的有效供給決定了1,3-丙二醇的產量和得率。採用PCR方法從Candidaboidinii
基因組中克隆編碼甲酸脱氫酶
基因fdh,將fdh基因片段插入載體pMAL^TM-p2X中,構建
表達載體pMAL^TM-p2X-fdh,並轉入1,3-丙二醇生產菌KlebsiellapneumoniaeYMU2,獲得重組菌KlebsiellapneumoniaeF-1。
- 中文名
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甲酸脱氫酶
- 方 法
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採用PCR方法
- 消 耗
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還原當量NADH
- 重組質粒
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具有良好的穩定性
培養方法
甲酸脱氫酶
研究了
重組質粒的穩定性和
IPTG誘導fdh基因過量表達的條件。結果表明,重組質粒具有良好的穩定性;fdh
基因表達的蛋白分子量為40.2kDa;IPTG誘導表達研究表明,在IPTG濃度為0.5mmol/L時,誘導4h後甲酸脱氫酶表達明顯;發酵過程中甲酸脱氫酶比酶活達到5.47U/mg;與
出發菌株K.pneumoniaeYMU2相比,重組菌F-1合成1,3-丙二醇的
濃度提高了12.5%