犬冠狀病毒

犬 冠狀 病 毒 (Caninecoronavi,l~S，CCV)屬 於尼 多病 毒 目(Nidovirales)、冠 狀 病 毒 科 (Coronaviridae)、冠狀 病 毒 屬 (Coronavirus)、冠 狀 病 毒 I羣 。CCV 由 Binn等 (1971)首先從腹瀉的德國軍犬中分離到的 ，病毒粒 子直 徑為 60～200nm，呈球 形 ，有囊膜 。核衣殼呈細絲狀 ．螺旋對稱 ，像其它囊膜病毒一樣。CCV 對熱 、脂溶劑 、非離子去污劑 、甲醛和氧化劑敏 感 ，對酸穩定 ，在-70℃或 凍幹後 在 4℃下可保存數年 。CCV 可在多種犬和貓的細 胞系中增殖 ，如原代犬腎細胞 ，犬胸腺和皮膚纖維瘤細胞 (A72)，貓肺細胞 (CRFK)等 。

犬冠狀病毒(CCV)基因組為一28～ 32 kb大小的單股正鏈RNA,基因在病毒自身RNA聚合酶的存在下、以先導引物轉錄機制進行轉錄,不同的病毒基因組和亞基因組翻譯產生除病毒依賴RNA的RNA聚合酶以外,還產生其它病毒的結構蛋白和非結構蛋白,其中有相對比較保守、參與病毒核衣殼形成、介導宿主細胞免疫的核衣殼蛋白(N);在病毒出芽、組裝和成熟中起重要作用的膜蛋白(M);能刺激機體產生中和抗體,且易變異的纖突蛋白(S)，另外S蛋白還決定着病毒血清型、感染力,同時通過識別,並與病毒宿主細胞受體相互作用決定病毒感染的宿主範圍;參與病毒組裝的小膜蛋白(E)和其它病毒蛋白.CCV還可識別貓氨肽酶N(fAPN)並與之相互作用。 ^[2] 

該病多發於寒冷的冬季 ，傳播迅速，數日內常成窩暴發 ；該病的發生雖無品種 、年齡、性別之分 ，但在犬羣中流行時 ，通常都是幼犬先發病 ，然後波及其他年齡的犬。幼犬的發病率和致死率均高於成年犬。幼犬症狀加劇，嘔吐和腹瀉是該病的主要症狀，成年犬症狀輕微 。該病的臨牀症狀和流行病學與輪狀病毒感染相似 ，而且常與輪狀病毒、犬細小病毒等混合感染 ，診斷較為困難。從動物迴歸試驗來看，病毒接種後1d就出現臨牀症狀。所有攻毒犬撲殺後都有腸以及腸繫膜淋巴結病變。但有1只犬沒有可觀察到的明顯症狀 ，原因可能是該病毒需與細菌混合感染才表現出明顯的臨牀症狀 ^[3]  。

犬冠狀病毒病是由犬冠狀病毒引起的，犬冠狀病毒可感染所有品種和各種年齡的狗（以幼犬受害嚴重），使狗產生輕重不一的胃腸炎症狀，臨牀上出現頻繁地嘔吐、腹瀉、沉鬱、厭食，臨牀症狀消失後14～21天仍可復發，是目前危害養狗業的一大傳染病。感染途徑是消化道，主要是由於接觸了病狗排出的糞便及污染物所致。病毒在糞便裏存活6～9天，污染物在水中可保持數天的傳染性。犬冠狀病毒可與貓傳染性腹膜炎病毒和豬傳染性胃腸炎病毒的抗血清發生反應，説明三者可能是一組病毒。該病毒對熱、紫外線和一般的化學藥品敏感。

潛伏期1～8天。本病傳染迅速，數日內可蔓延全羣。一般先表現嗜睡、衰弱、反覆嘔吐，以後糞便由糊狀、半糊狀至水樣，橙色或綠色，含黏液或血液，發燒或不發燒，白細胞減少，迅速脱水，死亡。隨着日齡的增長，死亡率降低。有的病例不表現臨牀症狀。犬冠狀病毒常和細小病毒一起混合感染，構成犬腹瀉大流行。

採用對症療法，如止吐、止瀉、補液，用抗生素防止繼發感染，立即斷食斷水，冠狀病毒是腸胃病，必須斷食斷水，如果腸胃裏面有食物和水分，病菌就會一直有而且拉稀更頻繁，之後帶到“正規獸醫站“輸液消炎和輸營養液，之後打血清，一般七天的療程就可以恢復，冠狀的治癒幾率在95%左右（獸醫站醫生説的），疫苗對犬冠狀病毒病沒有預防效果。減少發病的措施，就是加強飼養管理，嚴格執行獸醫衞生措施。

貓傳染性腹膜炎(FIP)是目前導致貓死亡的重要原因之一，從3個月到3齡貓以及大於10齡貓，特別是發生在那些純種貓和其它數量及種類繁多但養在一起的家養貓。貓冠狀病毒FeCV(Feline enteric Coronavirus)是高度傳染性病毒而且偏好發生在數量及種類繁多而且養在一起的家養貓。FeCV給貓帶來了極大的危險，FeCV陽性通常被認為是FIP的前奏。要控制貓FIP最根本的方法就是要做好FeCV的預防和控制。FeCV是廣泛的貓冠狀病毒Feline Coronavirus (FCoV)中的一種，FeCV抗體的存在僅表示有FeCV病毒存在和/或感染了FIP的可能性。對FeCV抗體呈陽性結果也不一定表示貓得到了FeCV病毒和/或感染了FIP，應該要和其它臨牀症狀結合起來一齊判斷。但陰性結果可説明沒有FeCV病毒和/或感染了FIP。

酶標板的孔中包被有純化的冠狀病毒抗原。從金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus提取的蛋白A與HRP結合成複合物。血清或血漿樣品和蛋白A酶標記物一起在酶標板的孔中孵育。如果貓樣品裏存在FCoV抗體，抗體將與孔中的抗原結合，再與蛋白A酶標記物結合。多餘的酶標記蛋白A被洗掉，加入髮色底物。清晰的藍色表示FCoV抗體存在，沒有顏色變化表明沒有FCoV抗體。

該試劑盒具有高特異性和靈敏度，操作簡單，30分鐘內可以知道結果。試劑盒裏包括陽性質控和陰性質控，僅需肉眼通過與陰性質控顏色進行比較，就可以準確地判斷樣品裏FCoV抗體的存在。

需1ul血清或血漿，只能檢測貓的樣品。樣品可在2-8C保存7天，如果需要更長的保存，樣品可保存在-20C。嚴重紅細胞溶解或脂溶血會產生干擾的顏色，所以儘可能去得到更好質量的樣品。

讓洗滌濃縮液達到室温，輕輕地倒置混勻。用蒸餾水或去離子水稀釋洗滌濃縮液（1份洗滌濃縮液加至9份水中），稀釋後的洗滌液可保存於2-7上升℃。

a. 檢測的有效性必須是：陽性質控孔裏的液體呈清晰的藍色，而陰性質控孔裏的液體保持清澈。

b. 假若樣品孔的顏色變化比陰性質控孔深很多則表明，該動物以前或目前正受到FCoV感染，並且有可能通過排泄物傳播病毒。此時便需要與其它的臨牀數據結合起來以確診FIP。

c. 如果樣品孔裏無顏色變化表明沒有感染FIP疾病。

以下內容物包含在試劑盒裏：

包被好的酶標板 8x12孔

陽性質控血清 1.5ml

陰性質控血清 7.0ml

蛋白A HRP標記物 5.0ml

TMB 7.0ml

底物緩衝液 7.0ml

濃縮洗滌液 100.0ml

* 試劑盒使用前恢復至室温（21-25C）

* 不同樣品使用不同的加樣器頭

* 不要把試劑盒直接暴露在陽光下

* 不要使用過期的試劑或不同試劑盒裏試劑一齊混雜使用

* 嚴格按照步驟操作，不適當的洗滌或試劑污染將產生非專一性的顏色

* 僅限獸醫使用

將試劑盒和稀釋的洗滌液保存於2-7℃，不要冷凍。只要在適當保存條件下，試劑在有效期內是穩定的。