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金黃色葡萄球菌
鎖定
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)也稱“金葡菌”,隸屬於葡萄球菌屬,是革蘭氏陽性菌代表,為一種常見的食源性致病微生物。該菌最適宜生長温度為37℃,pH為7.4,耐高鹽,可在鹽濃度接近10%的環境中生長。金黃色葡萄球菌常寄生於人和動物的皮膚、鼻腔、咽喉、腸胃、癰、化膿瘡口中,空氣、污水等環境中也無處不在。
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哈佛醫學院的科學家首次證明,金黃色葡萄球菌(一種常見的皮膚細菌)可以直接作用於神經細胞,引發瘙癢,相關成果刊發在 11 月 22 日的《Cell》期刊上。
金黃色葡萄球菌簡介
生物學特性
金黃色葡萄球菌形態為球形,在培養基中菌落特徵表現為圓形,菌落表面光滑,顏色為無色或者金黃色,無擴展生長特點,將金黃色葡萄球菌培養在哥倫比亞血平板中,在光下觀察菌落會發現周圍產生了透明的溶血圈。金黃色葡萄球菌在顯微鏡下排列成葡萄串狀,金黃色葡萄球菌無芽孢、鞭毛,大多數無莢膜。是常見的引起食物中毒的致病菌。常見於皮膚表面及上呼吸道黏膜。
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金黃色葡萄球菌對高温有一定的耐受能力,在80℃以上的高温環境下30min才可以將其徹底殺死,另外金黃色葡萄球菌可以存活於高鹽環境,最高可以耐受15%濃度的NaCl溶液。由於細菌本身結構特點,利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內將其快速殺死。金黃色葡萄球菌代謝類型為需氧或兼性厭氧,對環境要求不高,37℃為最適生長温度,能在各種惡劣環境中存活下來,因此,用一般的營養瓊脂即可正常培養細菌。
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金黃色葡萄球菌是常見的食源性致病菌,廣泛存在於自然環境中。金黃色葡萄球菌 在適當的條件下,能夠產生腸毒素,引起食物中毒。金黃色葡萄球菌引發的食物中毒報道層出不窮,由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒佔食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黃色葡萄球菌成為僅次於沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。
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流行病學
腸毒素是一種單鏈小分子蛋白,分子量約26-29 k Da,相對分子質量較低,具有熱穩定性,對人體腸道產生破壞,導致嘔吐腹瀉等症狀。研究已發現多種類型的腸毒素或類腸毒素,除傳統腸毒素A(SEA)、B(SEB)、C(SEC)、D(SED)、E(SEE)之外,SEG、SEH、SEI、SEJ、SEK、SEL、SEM、SEN、SEO、SEP、SEQ、SER、SEU 和 SEV 等腸毒素也不斷被發現。
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金黃色葡萄球菌限量標準
我國國家衞生和計劃生育委員會於 2013年發佈《食品安全國家標準 食品中致病菌限量》(GB 29921-2013)
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,在國標中制定了金黃色葡萄球菌的限量標準,規定熟肉製品、熟制水產品、熟制糧食製品等8大類食品中,同批次採集5份樣品,每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出1000 CFU/g,僅允許其中1份樣品在100~1000 CFU/g之間。
金黃色葡萄球菌檢測方法
傳統分離鑑定方法
世界上對食品中金黃色葡萄球菌的檢測通常採用生化鑑定的手段,並在初期採用平板劃線分離。當前我國檢測食品中金黃色葡萄球菌依據國家標準《食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗》(GB4789.10-2016)
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中的方法進行。國家標準執行內容包括定性檢測和定量檢測兩部分。在無菌條件下接種到肉湯中進行前增菌,最後將培養物接種劃線,根據生化鑑定方法進行血清學鑑定。傳統生化鑑定方法操作簡單,穩定性強,成本低,是最常用的鑑定方法。
免疫學檢測方法
免疫學檢測方法主要是基於免疫學理論研究,其是通過設計的抗原、抗體和免疫細胞,檢測抗原和抗體的結合以及免疫細胞分泌的細胞因子的,從而達到檢測目的一種實驗方法。該技術方法主要包括酶聯免疫法、免疫熒光法、免疫膠體金法等。
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①酶聯免疫法:其原理是利用抗體與抗原在載體表面的特異性結合,加入某種酶,酶與抗體或抗原結合在一起,從而形成可以跟蹤抗體或抗原的標記物,由於抗原或抗體與受檢樣品的反應產生抗原或抗體的複合物,此時加入酶反應顯色底物,產物的量的大小與檢測物質的量的大小呈正相關,分析顯色情況從而確定樣品中待檢測物的含量。已經開發了幾種根據 ELISA 技術用於檢測培養上清液和食物樣品(例如干酪,土豆沙拉,火腿和牛奶)中的金黃色葡萄球菌。
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②免疫熒光法:免疫熒光技術利用熒光色素對抗體或抗原進行標記,然後檢測目標抗原或抗體。抗原和抗體特異結合後,通過考察熒光信號的強弱進行定性定量檢測。與酶介導的免疫測定相比,基於熒光的免疫測定具有提供高通量分析和靈敏度的更大潛力。
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③免疫膠體金法:該方法藉助硝酸纖維膜為固定相載體,樣品溶液通過毛細作用在試紙條中移動,在試紙條中同時加入了針對待檢測物質特異性的抗原或抗體。與 ELISA 技術相比,免疫膠體金技術操作更為簡單,對實驗人員沒有特別的技術要求,適合基層單位和現場診斷。但是免疫膠體金相比較 ELISA 法而言,靈敏度更低,且使用範圍不廣,需要進一步的研究。總體而言,免疫膠體金有着強大的發展潛力和廣闊的應用前景。
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分子生物學檢測方法
該技術主要包括聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術,核酸探針技術,環介導等温擴增技術等技術。
①聚合酶鏈反應技術:該方法的原理是在DNA聚合酶的作用下,遊離的脱氧核糖核酸參照鹼基互補配對的原則,以模板DNA為主鏈,通過提供一段引物,迅速的擴增DNA的雙螺旋結構。PCR 技術特異性強、敏感度高,已廣泛應用於醫學、生物學等領域中。PCR作為致病微生物的檢測方法,穩定性強,是主流的檢測方法。在微生物檢測應用中,引物的設計以及靶序列的選擇是PCR方法的核心。PCR法同時也有一定的侷限性,由於該方法需要對樣品進行增菌,食品成分複雜,會對實驗造成干擾。與其他方法相比,PCR技術儀器設備價格高,需要花費的成本較高,推廣普及需要一定的時間和資金支持。
②核酸探針技術:通過使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術,通過檢測該段特異性的標記物,從而判斷是否含有目標微生物。核酸探針具有分子生物學檢測技術的靈敏度高、特異性強的優點,但是實驗週期長,操作繁瑣,如果樣品中目標微生物含量過低,極易造成樣品目標微生物未檢出,出現假陰性的實驗結果。
③環介導等温擴增技術:該技術基於DNA擴增技術,能夠在恆温條件下,根據設計的多對引物,利用鏈置換型DNA聚合酶快速的進行核酸的擴增。與PCR方法比較,環介導等温擴增法操作更加快捷簡單,花費成本較低,且對儀器要求低,能夠廣泛利用在食源性致病微生物的檢測中。
其他方法
試劑盒法:試劑盒法通常將十多種,甚至幾十種培養基或成分集中在特定微型裝置內,通過觀察微生物的生長和代謝過程的某些產物或現象,對試驗現象進行分析,將傳統試驗中多次試驗通過一次完成,縮短了檢測時間。此法可大大縮短測試時間,在24h內得出結果,甚至某些可縮短至4h內。用於檢測金黃色葡萄球菌的成品試劑盒有API、MIS等。
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金黃色葡萄球菌防控措施
4. 生產加工乳製品、肉類等高危食品的企業,應認真、嚴格的執行食品安全國家標準的相關規定。在加工過程中或在市場流通中發現產品檢驗的某些指標不符合食品安全國家標準,應以消費者利益為重,自覺把控出廠產品的質量、主動召回不合格產品,防範引起中毒事件的潛在風險。
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5. 政府相關部門要加強我國食品中金黃色葡萄球菌安全的風險識別和風險評估研究工作。重視並持續開展預防和控制食源性疾病的宣傳教育,及時提醒消費者一旦發生疑似金黃色葡萄球菌腸毒素中毒,除立即將患者送往醫院進行救治外,還要立即停止食用並封存可疑食品。同時對食品生產、加工、經營人員,普及預防食源性疾病的衞生學知識。
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金黃色葡萄球菌研究成果
2022年9月,南京郵電大學團隊構建了一種由透明質酸、光敏劑二氫卟吩(Ce6)和甲硝唑(MNZ)組成的納米試劑(HCM),用於耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)生物膜感染的治療。相關成果發表於國際學術期刊《自然·通訊》。
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- 參考資料
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- 1. 金黃色葡萄球菌致病的秘密武器 .萬方.2018-12[引用日期2019-06-24]
- 2. 生牛乳中金黃色葡萄球菌的快速檢測及耐藥性研究 .萬方.2018-05-14[引用日期2019-06-24]
- 3. 食品安全國家標準食品中致病菌限量 .食品夥伴網.2013-12-26[引用日期2019-06-24]
- 4. 食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗 .食品夥伴網.2016-12-23[引用日期2019-06-24]
- 5. 金黃色葡萄球菌檢測方法的研究進展 .萬方.2017-12-04[引用日期2019-06-24]
- 6. 肉製品中金黃色葡萄球菌的檢測方法 .萬方.2018-08-23[引用日期2019-06-24]
- 7. 金黃色葡萄球菌引起的食物中毒 及其實驗室檢測介紹 .東莞市疾病預防控制中心.2017-05-18[引用日期2021-04-21]
- 8. 舊藥新用,“納米藥”助力破解細菌感染-中國科技網 .其他.2022-09-16