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核酸分子雜交技術
(生物學的基本技術)
鎖定
由於核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用於基因克隆的篩選,酶切圖譜的製作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。
- 中文名
- 核酸分子雜交技術
- 相關技術
- 雜交,原位雜交等
- 特 點
- 靈敏度高、特異性強等
- 用 途
- 特異基因克隆的篩選等
核酸分子雜交技術基本原理
具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的温室度及離子強度等)可按鹼基互補還原成雙鏈。雜交的雙方是待測核酸序列及探針(probe),待測核酸序列可以是克隆的基因徵段,也可以是未克隆化的基因組DNA和細胞總RNA。核酸探針是指用放射性核素、生物素或其他活性物質標記的,能與特定的核酸序列發生特異性互補的已知DNA或RNA片段。根據其來源和性質可分為cDNA探針、基因組探針、寡核苷酸探針、RNA探針等。
核酸分子雜交技術相關技術
Southern 雜交
Northern 雜交
原位雜交(ISH)
熒光原位雜交(FISH)
芯片雜交(屬於固一液相雜交)
每一種雜交技術都有其特點,因探針的選擇不同又可以衍生出許多相關的技術,在不同領域發揮着重要作用。
核酸分子雜交技術特點
(1)靈敏度高、特異性強;
(2)用於 DNADNA和RNARNA的定性、定量檢測。
核酸分子雜交技術用途
(1)檢測特異 DNADNA序列的拷貝數、特定DNADNA區域的限制性內切酶圖譜,判定基因的缺失、插入、重排現象;
(2)特異基因克隆的篩選;
(3)核酸序列的初略分析;
(4)PCR技術的分子基礎。
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