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末端脱氧核苷酸轉移酶
鎖定
- 中文名
- 末端脱氧核苷酸轉移酶
- 外文名
- terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT
- 性 質
- 一種無需模板的DNA聚合酶
- 分子量
- 60000
末端脱氧核苷酸轉移酶簡介
【濃度】20u/ul
【性狀】懸浮液,重組酶。末端轉移酶(Terminal transferase,TdT)是一種無需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸結合到DNA分子的3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物。一般操作是:先在載體上打開一單個位點,把它與末端轉移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DNA片段則用互補的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述兩種都接上互補單鏈尾的DNA片段彼此退火,使形成一雜合載體來轉化受體菌。雜合載體中的裂隙或切口可被受體菌所修復。隨酶提供10×反應緩衝液和25mMCoCl2
【來源】一般自牛胸腺中分離。
末端脱氧核苷酸轉移酶功能
"末端轉移酶"催化的加上核苷酸至DNA分子的3'末端。不像大多數的DNA聚合酶,它不需要一個模板。這種酶的優選底物是3'突出端,但它也可以添加"核苷酸"(nucleotifes)至"鈍末端"(blunt end)或"凹陷的3'末端"(recessed 3' end)。鈷是一種必要的輔因子,但是在酶催化後反應在的鎂(Mg)和錳(Mn)施用"體外"(in vitro)。
末端脱氧核苷酸轉移酶使用
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