-
dNTP
鎖定
- 中文名
- dNTP
- 外文名
- deoxy-ribonucleoside triphosphate
- 別 名
- 脱氧核糖核苷三磷酸
- 地 位
- 生物DNA合成中
dNTP簡介
dNTP嘌呤
dATP(脱氧腺苷5'-三磷酸)和dGTP(脱氧鳥嘌呤5'-三磷酸)構成嘌呤。
腺嘌呤和鳥嘌呤是嘌呤中的基質,都具有雙環結構。
dNTP嘧啶
dTTP(脱氧胸苷5'-三磷酸)和dCTP(脱氧胞苷5'-三磷酸)構成嘧啶。
胸腺嘧啶和胞嘧啶是嘧啶中的特徵,它們都具有單環結構。
dNTPDNA結構
DNA的雙螺旋結構由dNTP組成,非常類似於聚合物中的單體單元。如果你解開DNA並想象它是一個階梯,磷酸基團與脱氧核糖糖基團交替組成梯子的兩側,(只有“糖磷酸骨架”這個詞),鹼基會形成梯子的梯級。DNA的一個重要特徵是兩個鹼基通過氫鍵連接形成一個梯級。這種結合將兩條DNA鏈保持在一起。嘧啶類不能配對,嘌呤也不能配對。鹼基配對只能在TA或GC之間進行。這是由Erwin Chargaff發現的。在他的實驗中,他從細胞核中提取DNA並記錄存在的四種核苷酸的量。他發現T的百分比總是等於A的百分比。在G和C之間發現了相同的關係。他還發現A或T的百分比加上G或C的百分比加到100%。這些發現極大地幫助了沃森,克里克,富蘭克林和威爾金斯。
dNTP氫鍵
G和C鹼基之間存在三個氫鍵,但A和T鹼基之間僅有兩個氫鍵。
因此,這意味着需要更多的熱能來使DNA變性,這比富含AT的DNA更富含GC。
dNTP形成DNA骨幹
如前所述,DNA的主鏈由交替的磷酸和脱氧核糖基團組成。在dna的一條鏈上的相鄰核苷酸之間形成的鍵是磷酸二酯鍵。當一個脱氧核糖的5'或3'碳原子與第一個磷酸上的氧鍵合時形成。這是從每個核苷酸中除去二磷酸的縮合反應。這就是為什麼DNA中發現的核苷酸實際上是dNMPs(脱氧核糖核苷酸單磷酸酯)。
[1]
dNTP儲存液
dNTP溶於pH為7.0的NaOH貯存液中,最初的貯存液可稀釋到10mol/L,分裝後存放在-20℃冰箱中。dNTP使用濃度在20~200 μmol/L之間。4種dNTP必須等濃度配合以減少錯配誤差。
[2]
dNTP使用濃度
在PCR反應中,使用低dNTP濃度,可減少非靶位置啓動和延伸時的核苷酸錯誤摻入。一般可根據靶序列的長度和組成來決定最低dNTP濃度。例如在100μl的反應體系中,4種dNTP的濃度為20μmol/L,可基本滿足合成2.6μg DNA或10pmol/L的400bp序列。
[2-3]
- 參考資料
-
- 1. DNTP .School of Biomedical Sciences Wiki[引用日期2019-06-26]
- 2. 郭葆玉 主編.基因工程藥學:第二軍醫大學出版社,2000.10:40
- 3. 鄭成木 主編.植物分子標記原理與方法:湖南科學技術出版社,2003.03:86
- 詞條統計
-
- 瀏覽次數:次
- 編輯次數:35次歷史版本
- 最近更新: 是家林吖