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斑點雜交法
鎖定
斑點雜交法是指將待測的
DNA變性後點加在
硝酸纖維素膜(或
尼龍膜、NC膜)上，用已標記的探針進行雜交，洗膜(除去未接合的探針)，
放射自顯影，判斷是否有雜交及其雜交強度，主要用於基因缺失或拷貝數改變的檢測。反覆沖洗進樣孔，取出膜烤乾或紫外線照射以固定標本，這時的膜就可以進行雜交。
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- 中文名
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斑點雜交法
- 定 義
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將待測的DNA變性後點加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜、NC膜)上，用已標記的探針進行雜交，洗膜(除去未接合的探針)，放射自顯影，判斷是否有雜交及其雜交強度，主要用於基因缺失或拷貝數改變的檢測
應用類似檢測
細菌菌落的方法，可以對
細胞培養物的特異序列進行快速檢測，將整個細胞點到膜上，經NaOH處理，使DNA暴露、變性和固定，再按常規方法進行雜交與檢測。有人曾用此法從105個培養細胞中檢測到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整細胞斑點印跡法可以用於篩選大量標本，因為它使細胞直接在膜上溶解，所以DNA含量甚至比常用的提取法還高，又不影響與32P標記的探針雜交，但它不適用於非放射性標記探針。
- 參考資料
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1.
郜金榮．分子生物學：化學工業出版社，2011