宇佐美麴黴

CNIFFI選育(2171經紫外外誘變)。能以野生植物為原料釀酒的糖化用菌。培養基47,最適培養温度28-30℃。

人工保存

釀酒

不詳

遺傳多樣性：

不詳 ^[1] 

營養體：粗長桿狀，兩端鈍圓，革蘭氏染色反應不定，產生β-羥基丁酸鹽（PHB）顆粒。菌體大小為（1.0~1.2）×（2.5~7.0）μm，菌體周圍有厚莢膜。

芽孢：壁厚，橢圓形，中生或近端生，芽孢囊不膨大或微膨大。菌落圓形，無色，隆起，膠質粘稠，透明或半透明，邊緣整齊。好氧或兼性厭氧生長，水解澱粉，接觸酶反應陽性，氧化酶和卵磷脂酶反應陰性，在無氮培養基上生長良好。

宇佐美麴黴具有解磷、解鉀的功能；

具有活化土壤中硅、鈣、鎂等元素的作用；

具有提高鐵、錳、銅、鋅、鉬、硼供應的功效；

提高或延長肥效，減少化肥用量；

提高作物抗逆性，預防或減輕病害。

朱天地將來自宇佐美麴黴(Aspergillususamii)E001的乙酰木聚糖酯酶基因在畢赤酵母(Pichiapastoris)GS115中實現異源表達,並對其相關酶學性質進行了研究。以宇佐美麴黴(A.usamii)E001總RNA為模板,利用軟件Oligo7.0設計引物Auaxe-F和Auaxe-R,進行RT-PCR擴增出編碼乙酰木聚糖酯酶的cDNA基因(Auaxe),構建重組克隆載體pUCm-T-Auaxe進行保種測序,結果顯示該基因序列長828bp,編碼275個氨基酸。將Auaxe序列與表達載體pPIC9KM連接,構建重組表達質粒pPIC9KM-Auaxe,SalI線性化後電擊轉入畢赤酵母基因組中,遺傳黴素(G418)篩選獲得陽性轉化重組酵母GS115/Auaxe,經1%甲醇誘導表達72h,以對硝基苯酚醋酸酯為底物,50℃、pH6.0條件下通過分光光度法測得重組乙酰木聚糖酯酶(reAuAxe)的酶活性為35.6U/mL。此外,為了提高乙酰木聚糖酯酶蛋白的表達量,對GS115/Auaxe的誘導表達條件進行了優化,reAuAxe的酶性活最高達到98.5U/mL,是優化前的2.11倍。採用(NH4)2SO4沉澱、DEAE-52陰離子交換層析和透析的方法對重組乙酰木聚糖酯酶粗酶液進行分離純化。結果表明,其純化倍數為1.7,回收率為63.1%,SDS-PAGE電泳結果顯示純化後的乙酰木聚糖酯酶在34.0kDa處有一條清晰條帶,測其比酶活為390.5U/mg。該酶最適作用pH為6.0,在pH4.5~7.0之間性質較穩定;最適作用温度為50℃,在45℃及以下性質穩定;所測金屬離子及EDTA對該酶活性影響不明顯;以對硝基苯酚醋酸酯為底物,在50℃、pH6.0的條件下,該酶的Km和Vmax值分別為0.72mmol/L和555.6U/mg。以小麥麩皮為研究對象,探究重組乙酰木聚糖酯酶分別與重組木聚糖酶(reAuXyn11A和reAuXyn10A)、重組纖維素酶(reAuCel12A)及複合酶之間的協同作用。結果表明,當reAuAxe與reAuXyn11A的酶量比為5:1時協同效果較好,還原糖生成量比reAuXyn11A單獨作用增加了46%;當reAuAxe與reAuXyn10A的酶量比為5:1時協同效果較好,還原糖生成量增加了16%;同樣reAuAxe與reAuCel12A以5:1添加時,還原糖生成量比reAuCel12A單獨作用增加了28.4%;reAuAxe與複合酶以5:1添加時,還原糖生成量提高了33.6% ^[2]  。

楊琥研究宇佐美麴黴酸性蛋白酶(PepA)的基因合成宇佐美麴黴酸性蛋白酶PepA基因由1182個鹼基組成並編碼394個氨基酸(其中有20個氨基酸編碼信號肽序列,50個氨基酸編碼前導肽,324個氨基酸編碼成熟酶)。編碼區在不改變氨基酸序列的前提下,根據畢赤酵母密碼子的偏愛性進行優化併合成pepA。PepA表達載體的構建和表達PepA在畢赤酵母載體pHBM905A中成功地實現表達。重組酵母菌體命名為PEPASA ^[3]  。