吖啶酯

如果吖啶環上的取代基能與吖啶環上的C-9 和H2O2（過氧化氫）形成不穩定的二氧乙烷（此二氧乙烷可迅速分解為CO2 和電子激發態的N - 甲基吖啶酮，當回到基態時發出光子），則這類取代吖啶化合物可做為化學發光標記物。

根據取代基的不同，常用作化學發光標記物的吖啶取代物分為兩類：吖啶酯和吖啶磺酰胺。它們的結構中都有共同的吖啶環。 它們的發光機理相同：在鹼性H2O2 溶液中， 分子受到過氧化氫離子進攻時， 生成不穩定的二氧乙烷， 此二氧乙烷分解為CO2 和電子激發態的N - 甲基吖啶酮， 當其回到基態時發出最大發射波長為430nm 的光子。這類化合物從發光的機理來説特點是： ①發光反應中在形成電子激發態中間體之前， 聯結於吖啶環上的不發光的取代基部分從吖啶環上脱離開來， 即未發光部分與發光部分分離， 因而其發光效率基本不受取代基結構的影響。②吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物化學發光不需要催化劑， 在有H2O2 的稀鹼性溶液中即能發光。因此應用於化學發光檢測具有許多優越性。優點主要有：①背景發光低，信噪比高；②發光反應 干擾因素少；③光釋放快速集中、發光效率高、發光強度大；④ 易於與蛋白質聯結且聯結後光子產率不減少；⑤標記物穩定（ 在2 - 8 ℃下可保存數月之久）。因此吖啶酯或吖啶磺酰胺是一類非常有效、非常好的化學發光標記物。

這類化合物的發光為閃光型，加入發光啓動試劑後0. 4s 左右發射光強度達到最大， 半衰期為0. 9s 左右。

吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物應用於化學發光免疫分析（CLIA），通常採用的體系是Acridinium ester/ H2O2 系統。 即用吖啶酯或吖啶磺酰胺標記抗體或抗原， 用HNO3+ H2O2 和NaOH 作發光啓動試劑。有些在發光啓動試劑中加入Triton X - 100 , CTAC , Tween - 20 等表面活性劑以增強發光。

常用的吖啶酯和吖啶酰胺類化合物結構以及發光反應步驟參見附圖。