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分子排阻色譜法
鎖定
- 中文名
- 分子排阻色譜法
- 外文名
- Size exclusion chromatography(SEC)
- 別 名
- 空間排阻色譜法,凝膠色譜法
- 應用學科
- 儀器分析
分子排阻色譜法分類
分類 :凝膠過濾色譜法- GFC (採用水溶液或緩衝液作為流動相)和凝膠滲透色譜法 - GPC(採用有機溶劑作為流動相)
分子排阻色譜法適用範圍
適用範圍:適用於對未知樣品的探索分離,它能很快提供樣品按分子大小組成的全面情況,並迅速判斷樣品是簡單的還是複雜的混合合物,並提供樣品中各組分的近似分子量。這種分離方法不宜用於分子大小組成相似或分子大小僅差10%的組分分析,如同分異構體的分離不宜用分子排阻色譜法。
分子排阻色譜法分離機理
1、主要取決於凝膠的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關係,與流動相的性質沒有直接的關係。
2、樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小於孔徑的組分進入,這些孔對於溶劑分子來説是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先從柱中被流動相洗脱出來;中等大小的分子能進入凝膠中一些適當的孔洞中,但不能進入更小的微孔,在柱中受到滯留,較慢地從色譜柱洗脱出來;小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強的滯留,會更慢的被洗脱出;溶解樣品的溶劑分子,其分子量最小,可進入凝膠的所有孔洞,最後從柱中流出,從而實現具有不同分子大小樣品的完全分離。在分子排阻色譜法中,溶劑分子最後從柱中流出,這一點明顯不同於其他液相色譜法。
4、對與某一大小分子其洗脱一體積等於流動相體積與該尺寸溶質可以滲透進入空洞內部的那部分體積的總和。Ve=Vo+KVp