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Northern blotting
鎖定
Northern 雜交(Northern blotting)
1979年,J.C.Alwine等提出:將電泳凝膠中的RNA轉移到疊氮化的或其他化學修飾的活性濾紙上,通過共價交聯作用使它們結合,因其方法同Southern雜交十分相似,故稱之為Northern雜交。
- 中文名
- 雜交
- 外文名
- Northern blotting
- 人 物
- J.C.Alwine
- 提出時間
- 1979年
Northern blotting定義
Northern雜交是利用DNA可以與RNA進行分子雜交來檢測特異性RNA的技術,首先將RNA混合物按它們的大小和分子量通過瓊脂糖凝膠電泳進行分離,分離出來的RNA轉至尼龍膜或硝酸纖維素膜上,再與放射性標記的探針雜交,通過雜交結果可以對錶達量進行定性或定量。
RNA混合物進行瓊脂糖凝膠電泳→分離得到的RNA轉膜→與放射性標記的探針雜交 →結果分析
Northern blotting性質
Northern雜交與Southern雜交相比,條件要嚴格些,特別是RNA容易降解,前期製備和轉膜過程易受RNase污染,要獲得較好結果,需用穩定性最差的mRNA與DNA進行雜交,對實驗條件要求嚴格;然而有些應用中Northern雜交避免用複雜探針篩選cDNA文庫的繁瑣