Dicer酶

在研究RNA干擾機制的過程中，Bernstein等從已經發生RNA干擾的果蠅S2細胞中純化了一種核酸酶Dicer，從中分離出21~23個鹼基對的dsRNA片段。説明該核酸酶具有序列特異性，它能降解與dsRNA具有同源序列的mRNA。研究表明Dicer是來自果蠅RNA干擾必須的RNaseIII型蛋白，含有一個解旋酶、結構域、富含穀氨酸區、一個PAZ結構域、PiWi區、RNaseIII和dsRNA結合區。Dicer在催化過程中以二聚體的形式出現，其催化結構域在dsRNA上反平行排列，形成4個活性位點，但只有兩側的2個位點有內切核酸酶活性。

Dicer的作用機制Bernstein認為分二步:

第一步：Dicer結合到dsRNA，dsRNA被加工成許多短片段，每個片段約22nt。

第二步：22nt的siRNA通過PAZ與含有PAZ的Argonaute蛋白結合，而RNase與後者形成多個亞單元的複合物，這樣使得22ntsiRNA特異性的決定靶基因的降解反應。這個22ntsiRNA被稱為引導RNA，它可以將多單元複合物引到靶基因mRNA處。因為有引導siRNA在起作用，所以只要有少量的dsRNA就可以引發大量的切割mRNA反應。