DC細胞

2011年10月3日，瑞典卡羅琳醫學院在斯德哥爾摩宣佈，2011年諾貝爾生理學或醫學獎授予加拿大科學家拉爾夫·斯坦曼、生於盧森堡的法國籍科學家朱爾斯·霍夫曼以及美國科學家布魯斯·博伊特勒，以表彰他們在免疫學領域取得的革命性研究成果。其中，斯坦曼(RalphM。Steinman)教授，因其在免疫系統領域以及樹突狀細胞(Dendriticcell簡稱DC)等一系列研究發現，獨享獎金的一半，另外一半由其他兩位科學家分享。

最新研究顯示DC細胞與CIK細胞共培養後,提高了細胞的增殖速度和殺傷活性,且使其對腫瘤細胞的殺傷作用更具特異性。而且DCCIK細胞對於血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系統等多個系統腫瘤細胞均有殺傷作用。

目前，常規進行CIK細胞、DC細胞或DC-CIK細胞的培養技術都是首先用血細胞分離機體外循環病人4000-8000毫升外周血，提取出外周血裏的單個核細胞，然後在GMP實驗室進行細胞培養獲得具有抗癌活性的CIK、DC或DC-CIK免疫細胞。此過程中用血細胞分離機大劑量提取腫瘤病人外周血中的單個核細胞(幼稚細胞)可能會對病人的免疫系統造成損傷，臨牀操作時具有較大風險，很多腫瘤病人由於身體虛弱而無法完成此過程。要想克服這一困難，唯有運用極高極嚴格的的細胞培養技術。讓腫瘤患者獲得無風險無損傷的腫瘤免疫細胞治療成為醫護人員和研發人員的責任，經過兩年多幾百次的實驗，終於取得了重大突破，實現了DC-CIK細胞的高效率培養，培養效率比常規技術提高了百倍。現在只需要採集病人40毫升左右的外周血，就可以培養出10^10個DC-CIK細胞，明顯優於常規的培養方法，其效應細胞CD3+CD56+高達30%以上。DC-CIK抗癌細胞實驗表明，DC-CIK細胞的殺癌細胞的殺傷活性明顯高於CIK細胞，與血細胞分離機採集PBMC方法培養的DC-CIK細胞癌細胞活性相當，21世紀初人類開始的生命方舟計劃對於DC細胞的研究取得了長足的進步。

DC細胞是已知體內功能最強、唯一能活化靜息T細胞的專職抗原提呈細胞，是啓動、調控和維持免疫應答的中心環節。通過大量體外活化培養負載腫瘤抗原的DC細胞，當細胞數量達到一定數量後回輸給病人，可誘導機體產生強烈的抗腫瘤免疫反應。

DC是腫瘤細胞免疫治療的重要成分。DC細胞疫苗在操作上具有很大的靈活性，包括DC細胞的來源、分離方法、抗原引入方法、延長存活時間、提高活性等各個方面都有許多不同的操作方法，每種方法都各有優勢，因此可以通過不同的優化、組合衍化出多種治療方法，從而適應於不同條件的患者。大量研究顯示DC疫苗安全，易於操作，對於一系列類型的腫瘤均有免疫抑制作用，並在腫瘤的免疫治療取得了令人鼓舞的初步結果。

“DC細胞之父”利用自身免疫細胞攻擊病毒成功

令人稱奇的是，本屆諾貝爾生理學或醫學獎的獲得者之一斯坦曼教授，又被譽為“DC細胞之父”，他在2006年就查出胰腺癌晚期。在醫學上，晚期胰腺癌的惡化程度高，生存期不會超過6個月。然而，斯坦曼教授正是在接受了以他自己的研究成果“樹突細胞”(DC細胞)為依據的細胞免疫治療後，成功地將生命延長。

1.抽取病人外周血50-60ml——分離單個核細胞，體外誘導DC細胞——DC細胞負載腫瘤抗原，通過靜脈回輸給病人或經皮下注射——經腫瘤抗原負載DC能刺激自體T細胞——產生強烈的抗腫瘤免疫應答。

2.抽取病人外周血50-60ml——分離單個核細胞，體外誘導DC細胞——DC細胞負載腫瘤抗原並與自體的淋巴細胞混合，刺激自體T細胞產生細胞毒性T淋巴細胞——將這些細胞毒性T淋巴細胞，通過靜脈回輸給病人——直接殺傷腫瘤細胞。

DC細胞治療通過採用病人自體的單個核細胞在體外培養誘導生成DC，然後負載相應的腫瘤抗原，製成負載腫瘤抗原的DC，再將這些DC細胞注入體內後刺激體內的腫瘤殺傷性淋巴細胞增殖，發揮長期腫瘤監視作用和腫瘤殺傷作用，達到消滅腫瘤的目的。

DC細胞治療適用於惡性黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、膀胱癌、卵巢癌、結腸癌、直腸癌、乳腺癌、宮頸癌、各種肺癌、喉癌、鼻咽癌、胰腺癌、肝癌、胃癌等。

在腫瘤免疫中，DC不能直接殺傷腫瘤細胞，但能通過識別腫瘤細胞特異性抗原，將其信號呈遞給具殺傷效應的T細胞來達到監測、殺滅腫瘤的功能。

誘導產生大量效應T細胞啓動效應T細胞遷移至腫瘤部位

保持效應T細胞在腫瘤部位的長期存在

抑制腫瘤血管的生成

DC-CIK (或DC+CIK)是指與DC細胞共培養的CIK細胞。細胞因子誘導的殺傷細胞（cytokine-induced killers,CIK）是一類抗腫瘤抗病毒效應細胞，能在體外被誘導並大量增殖。樹突狀細胞（dendritic cell,DC）是有效的專職抗原提呈細胞，成熟的DC可以通過Ⅱ型組織相容性抗原（MHC-Ⅱ）等途徑提呈腫瘤抗原，有效抵制腫瘤細胞的免疫逃逸機制。CIK細胞和DC細胞是細胞免疫治療的2個重要組成部分，兩者聯合可確保高效的免疫反應。

CIK細胞和同源DC細胞共培養後即可獲得DC-CIK細胞。它既可促進DC細胞的成熟，更能促進ClK的增殖，並加強其抗腫瘤活性。DC細胞是機體免疫應答的始動者，能夠誘導持久有力的特異性抗腫瘤免疫反應；CIK細胞可通過非特異性免疫殺傷作用清除腫瘤患者體內微小殘餘病灶，所以負載腫瘤抗原的DC與CIK的有機結合（即DC-CIK細胞）能產生特異性和非特異性的雙重抗腫瘤效應。

①DC可以高表達MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子，MHC分子與其捕獲加工的腫瘤抗原結合，形成肽-MHC分子複合物，並遞呈給T細胞，從而啓動MHC-I類限制性CTL反應和MHC-Ⅱ類限制性的CD4+ Thl反應。同時，DC還通過其高表達的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T細胞活化所必須的第二信號，啓動了免疫應答。

②DC與T細胞結合可大量分泌IL-12、IL-18激活T細胞增殖，誘導CTL生成，主導Th1型免疫應答，利於腫瘤清除；激活穿孔素P顆粒酶B和FasL/Fas介導的途徑增強NK細胞毒作用；

③DC分泌趨化因子(Chemotactic Cytokines， CCK)專一趨化初始型T細胞促進T細胞聚集，增強了T細胞的激發。保持效應T細胞在腫瘤部位長期存在，可能通過釋放某些抗血管生成物質(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影響腫瘤血管的形成。上述CCK進一步以正反饋旁分泌的方式活化DC，上調IL-12及CD80、CD86的表達；同時DC 也直接向CD8+T細胞呈遞抗原肽，在活化的CD4+ T細胞輔助下使CD8+ T細胞活化，CD4+ 和CD8+T細胞還可以進一步通過分泌細胞因子或直接殺傷，增強機體抗腫瘤免疫應答。

①. CIK細胞能以不同的機制識別腫瘤細胞通過直接的細胞質顆粒穿透封閉的腫瘤細胞膜進行胞吐。實現對腫瘤細胞的裂解;

②. 通過誘導腫瘤細胞凋亡殺傷腫瘤細胞;

③. CIK細胞分泌IL-2、IL-6、IFN-γ等多種抗腫瘤的細胞因子；

④. CIK細胞回輸後可以激活機體免疫系統，提高機體的免疫功能。