外周血

[英] peripheral blood

正常人外周血中一般看不見幼稚的幹細胞的,只存在有極少量的造血幹細胞，其含量為0.01%左右。如果幼稚細胞的比例大幅增加，有可能是類白血病。正因為存在0.01%的造血幹細胞，可利用細胞分離的技術(血細胞自動分離機)，將外周血中含有造血幹細胞的單個核細胞進行分離保存，重複數次達一定細胞數量後，回輸給患者以之代替骨髓而進行的幹細胞移植，稱為外周血幹細胞移植。

培養基的大部分是水，所以水的質量直接影響培養基的質量。按Waymouth標準，水的電阻應為200萬歐姆，一般實驗室裏以玻璃蒸餾器製備的

雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。

培養基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基，以雙蒸或三蒸水配製。NaHCO3（或HCl）調pH至7.2～7.4，若pH值超

過7.6或遠低於6.8，則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。

培養中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配製時含量視培養細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由於血清成分複雜、條件不易控制，可選用無血清培養基。

為防止培養時期細菌的污染，可在培養基中添加適當抗菌素，一般用量與組織細胞培養相同：卡那黴素100單位/毫升，或雙抗--青黴素100單位/

毫升，鏈黴素100微克/毫升。

非增殖期的細胞不能製備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。

經實驗測定其分裂高峯分別於培養後44—48小時和68—72小時。

PHA有粘多糖，蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質起凝集作用。PHA激活的細胞數隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均

被激活為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般採用4%濃度為好。