-
觸酶試驗
鎖定
- 中文名
- 觸酶試驗
- 外文名
- Catalase test
- 別 名
- 過氧化氫酶
- 注意事項
- 3%H2O2溶液要新鮮配製
- 定 義
- 關於觸酶的一個實驗做法
- 作 用
- 催化過氧化氫成為水和原子態氧
觸酶試驗原理
觸酶試驗試劑藥品
1.50m mol/l pH7.0的磷酸緩衝液
2.0.3% H202:吸0.5ml 30% H202加入pH7.0的磷酸緩衝液至 50ml
3.0.2% 愈創木酚 :秤0.2g愈創木酚加入pH7.0的磷酸緩衝液至 100ml
觸酶試驗實驗步驟
酶液的製備
1.稱取葉片 0.25g ,加入5倍量的(M/V)pH7.0 的PBS冰浴研磨 15000r/min
離心15min取部分上清液經適當稀釋後用於酶活性測定。
2.CAT活性的測定
在3ml的反應體系中,包括0.3% H2021ml, H20 1.95ml, 最後加入0.05ml酶液
啓動反應,測定波長240nm處的OD降低速度。將每分鐘OD減少0.01定義為1個活力單位。
3.POD活性的測定
在3ml的反應體系中,包括0.3% H2021ml, .0.2% 愈創木酚0.95ml,pH7.0的PBS 1ml,最後加入0.05ml酶液啓動反應,記錄470nm處OD增加速度。將每分鐘OD增加0.01定義為1個活力單位。
4. 用考馬斯亮藍 G-250法測定蛋白含量.
觸酶試驗結果
觸酶試驗應用
觸酶試驗注意事項
①3%H2O2溶液要新鮮配製。
②不宜用血瓊脂平板上生長的菌落,因紅細胞含有觸酶,可致假陽性反應。
③取對數生長期的細菌。
- 參考資料
-
- 1. 毛細管用於觸酶試驗 .中國知網[引用日期2018-11-23]