苯酚-硫酸法

1． 濃硫酸：優級純以上

2． 6%苯酚：使用重蒸試劑（分析純）按比例與水混合並搖勻。

3. 待測多糖。

1．製作標準曲線：準確稱取標準葡聚糖（或葡萄糖）20mg於500ml容量瓶中，加水至刻度，分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸餾水補至2.0ml，然後加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻靜置30分鐘以後於490nm測吸光度，以2.0ml水按同樣顯色操作為空白，橫座標為多糖微克數，縱座標為光密度值，得標準曲線。

2. 取多糖樣品1.0ml，加1.0ml蒸餾水，然後加入6%苯酚1.0ml，迅速加入濃硫酸5.0ml，在渦旋儀上震盪，充分混勻，靜置30分鐘，於490nm測定吸光度，並將測得的吸光度帶入標準曲線中，可獲得多糖濃度。

（1）此法簡單、快速、靈敏、重複性好，對每種糖僅製作一條標準曲線，顏色持久。

（2）製作標準線宜用相應的標準多糖，如用葡萄糖，應以校正係數0.9校正μg數。

（4）測定時根據光密度值確定取樣的量。光密度值最好在0.1——0.3之間。比如：小於0.1之下可以考慮取樣品時取2克，仍取0.2ml樣品液，如大於0.3可以減半取0.1ml的樣品液測定。