胞外區

已經有許多表達在惡性細胞上的腫瘤相關抗原(tumor-associatedantigens,TAA)被證實,並且一些抗-TAA的抗體已經從實驗室走向了臨牀。抗-TAA的抗體不僅它們本身是靶向治療藥物,而且還可以作為其他藥物和效應細胞的靶向媒介。

/抗CD20Fab’融合蛋白的構建和表達

CD20主要表達在前B細胞和成熟B細胞及95%以上的NHL淋巴瘤細胞,是可以用來作為腫瘤靶向免疫治療的抗原。HI47(IgG3)是我所於1990年研製成功的抗CD20鼠源性單克隆抗體,第四屆國際人類白細胞分化抗原會議將HI47命名為CD20+X。CD20單抗本身難以穿透實體腫瘤發揮殺傷作用,而缺失恆定區的小型基因工程抗體雖然具有較好的穿透性,但半衰期短且本身細胞毒作用低。因此,抗體片段與放射性同位素、前藥(prodrug)、生物毒素及免疫效應細胞形成偶聯物成為治療腫瘤特別是實體瘤的首選方案。其中最有臨牀應用前景的是利用雙特異抗體使針對腫瘤抗原的抗體片段與免疫效應細胞相連,共同作用於腫瘤細胞,實現腫瘤的靶向治療。

近來的研究表明,經4-1BB/4-1BBL信號途徑的協同刺激在許多模型顯示出抗腫瘤效應,同時應用4-1BBL和CD3單抗可代替專職抗原提呈細胞的刺激能力,然而全身性的T細胞激活將導致臨牀副作用,所以CD3/4-1BB信號必須嚴格定位在腫瘤位點。為了特異性定向腫瘤細胞,我們已成功構建了抗CD3/抗CD20Diabody表達載體[2],並證實抗CD3/抗CD20Diabody具有明顯的抑制腫瘤生長的活性。為了進一步提供腫瘤特異性的4-1BB協同刺激,我們構建了人4-1BBL胞外區基因表達載體pAYZ4-1BBL[4],生物學活性研究發現它能使激活的T細胞系IL-2的釋放增加,並使激活的T細胞系凋亡減少1倍以上,在此基礎上我們研究並構建了人4-1BBL胞外區/抗CD20Fab’融合蛋白表達載體。