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細菌生長曲線
鎖定
- 中文名
- 細菌生長曲線
- 外文名
- Bacterial growth curve
- 特 指
- 單細胞微生物
- 實 質
- 曲線
細菌生長曲線定義
細菌生長曲線具體描述
細菌生長曲線遲緩期
遲緩期(lag phase):又叫調整期。細菌接種至培養基後,對新環境有一個短暫適應過程(不適應者可因轉種而死亡)。此期曲線平坦穩定,因為細菌繁殖極少。遲緩期長短因素種、接種菌量、菌齡以及營養物質等不同而異,一般為1~4小時。此期中細菌體積增大,代謝活躍,為細菌的分裂增殖合成、儲備充足的酶、能量及中間代謝產物。生物製藥中常通過加入酶激活劑如鎂離子等縮短遲緩期。
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細菌生長曲線對數期
對數期(logarithmic phase):又稱指數期。此期生長曲線上活菌數直線上升。細菌以穩定的幾何級數極快增長,可持續幾小時至幾天不等(視培養條件及細菌代時而異)。此期細菌形態、染色、生物活性都很典型,對外界環境因素的作用敏感,因此研究細菌性狀以此期細菌最好。抗生素作用,對該時期的細菌效果最佳。
細菌生長曲線穩定期
穩定期(stationary phase):該期的生長菌羣總數處於平坦階段,但細菌羣體活力變化較大。由於培養基中營養物質消耗、毒性產物(有機酸、H2O2等)積累pH下降等不利因素的影響,細菌繁殖速度漸趨下降,相對細菌死亡數開始逐漸增加,此期細菌增殖數與死亡數漸趨平衡。細菌形態、染色、生物活性可出現改變,併產生相應的代謝產物如外毒素、內毒素、抗生素、以及芽胞等。
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細菌生長曲線衰亡期
衰亡期(decline phase):隨着穩定期發展,細菌繁殖越來越慢,死亡菌數明顯增多。活菌數與培養時間呈反比關係,此期細菌變長腫脹或畸形衰變,甚至菌體自溶,難以辨認其形。生理代謝活動趨於停滯。故陳舊培養物上難以鑑別細菌。
細菌生長曲線測定
細菌生長曲線測定原理
將細菌接種到一隻具有側壁試管的三角燒瓶內的培養液中,在適宜的培養温度和良好的通氣狀態下,定時取出此三角燒瓶,用"721"分光光度計測定菌濃度(光密度值,OD值),並將所得結果與相對應的培養時間繪製出座標圖,就可獲得該菌的生長曲線。此測定法的優點是不改變菌液體積並用同一培養容器的正常生長條件下,連續讀取OD值,故不但可測出細菌生長曲線,還可比較同一菌株在不同的培養基和培養條件下的生長規律。
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細菌生長曲線測定步驟
(3)接種及零時測定:用移液吸管吸取2.SmL種子培養液接種瓶中,並充分搖勻。將剛接種的培養液傾入側臂試管中,測定光電比色計OD值。此時的讀數為接種後菌種生長曲線中的零時讀數值(即接種拭)。
(4)培養及生長量測定將零時測定後的三角燒瓶立即放入恆温水浴搖牀上震盪培養,培養温度為3TC,搖牀的頻率為100次/min 左右(温度和頻率可隨時調節)。在培養中,應每隔30min從搖牀上取下三角燒瓶, 將菌液傾入側臂試管中,並在光電比色計上讀取OD值。記錄每次所測得的數據。在每次測定時,均要用空白對照管的培養液來校正光電比色計的零點。