-
福爾根反應
鎖定
- 中文名
- 福爾根反應
- 作 用
- 顯示DNA
- 類 別
- 染色法
- 呈 現
- 紫紅色
福爾根反應簡介
DNA經弱酸(1mol/L HCl)水解後,嘌呤鹼與脱氧核糖間的糖苷鍵被打開,並且使脱氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開,在脱氧核糖的一端形成遊離的醛基。醛基在原位與Schiff(無色品紅亞硫酸溶液)試劑結合,形成紫紅色化合物,使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色陽性反應。紫紅色的產生是因為反應產物的分子內有醌基(醌基是一個具有顏色的髮色團),所以凡含有DNA的部位,就呈紫紅色。而RNA用此法處理後則分解。
[1]
福爾根反應Unna染色法
1899年Pappenheim 首創了甲基綠-哌洛寧(mehtyl-green-pyronim)染色法。1902年Unna對這一方法進行了改良。 1940年Brachet研究證明用甲基綠—哌洛寧對DNA和RNA有選擇性的染色效果。鹼性的甲基綠-哌洛寧
福爾根反應實驗例子
福爾根反應材料
洋葱根尖, 洋葱鱗莖表皮細胞
福爾根反應試劑
1)Carnoy固定液: 無水乙醇:冰醋酸 = 3:1
2)95% 乙醇
3)70% 乙醇: 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL
4) 5% 三氯乙酸(TCA):固體TCA 5g,加水溶解到100 mL。
5) 1N HCl (當量鹽酸)
6) Schiff 試劑:煮沸200mL 水,稍冷放入1g 鹼性品紅,充分攪拌有助溶解,50℃時過濾,置磨口棕色瓶內,向濾液中加1N HCl 20mL ,待25℃時加亞硫酸氫鈉或亞硫酸鉀 1g ,蓋嚴放暗處,靜止勿動,幾天後,紅色稍退,溶液呈無色或淡黃色,即可使用,如有紅色,可加一勺活性炭,振盪過濾,黑布罩好。
7) Unna 染色液(甲基綠-哌洛寧G)
溶液A: 5% 哌洛寧G 水溶液 17.5 mL
2% 甲基綠水溶液 10 mL
蒸餾水 250 mL
溶液 B:0.2mol/L 的pH為4.8的 醋酸鹽緩衝液。配法:先將1.2mL 醋酸液用水稀釋到100mL,再將2.7g的醋酸鈉用水稀釋到100mL,然後將醋酸和醋酸鈉兩液按77mL和100mL的比例混合。