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牛血清清蛋白
鎖定
- 中文名
- 牛血清清蛋白
- 外文名
- Bovine serum albumin
- 含 義
- 通過改變離子強度
- 目 的
- 研究了泡沫提取ADR的條件
- 意 義
- 更好的利用
牛血清清蛋白參數
採用熒光法測定ADR,考察了操作液成分和pH值對測定的影響。實驗結果表明:BSA濃度200mg/L,ADR濃度2.0u/mL,pH2.40,NaCl濃度0.5mol/L,氣體流速15mL/min,進料體積8.0mL時,阿黴素的二次提取率可達70.3%。並且對其作用機理進行了討論,ADR實現泡沫提取的主要動力是ADR的疏水部分與BSA分子間發生的疏水作用力。
牛血清清蛋白方法
利用CTAB/正辛醇:
三氯甲烷(4:1V/V)反膠團體系對牛血清白蛋白(BSA)進行相轉移中,通過對萃取體系水相的pH值、離子強度、兩液相的體積比、小分子糖(葡萄糖、蔗糖)及助表面活性劑(直鏈醇分子)等因素的改變,探討了BSA在陽離子表面活性劑體系的萃取機理;
研究結果表明選擇合適的條件提取BSA時,萃取率可達到97%,反萃率達到了85%;找到實現牛血清白蛋白分離提純的有效方法。
1、標準曲線測定法
分別取六隻試管,其中一隻加入1.0ml蒸餾水做空白,5只分別加入不同體積的濃度為100ug/ml牛血清清蛋白標準液,補充水到1.0ml。然後每隻試管加入5.0ml考馬斯亮藍G-250試劑,搖勻放置5min,在紫外-可見分光光度計595nm處測定吸光值。以A595吸光值為縱座標,牛血清清蛋白的ug數量為橫座標繪製標準曲線。具體操作見下表。
蛋白質標準曲線測定加樣
試劑空白12345
100ug/ml牛血清清蛋白/ml1.00.10.20.40.60.8
牛血清清蛋白/ug01020406080
去離子水/ml00.90.80.60.40.2
考馬斯亮藍G-250試劑/ml5.05.05.05.05.05.0
吸光值A595
2、蛋白樣品
配製濃度約100ug/ml的待測蛋白質溶液。取一隻試管加入1.0ml蒸餾水做空白,一支加入0.5ml待測蛋白質溶液,補充水到1.0ml。然後每支試管加入5.0ml考馬斯亮藍G-250試劑,搖勻放置5min後,在紫外-可見分光光度計595nm處測定吸光值。用測得的吸光值從標準曲線上查得相當於牛血清清蛋白的ug數量,計算出待測蛋白質的含量。
在標準蛋白質和蛋白質樣品的測定時,為了減小誤差,每一個濃度的蛋白質做3支平行管。
3、試劑配置