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熔解曲線
鎖定
- 中文名
- 熔解曲線
- 外文名
- Melting curve
- 作 用
- 確定不同的反應產物
- 應用學科
- 生物學
熔解曲線定義
熔解曲線原理
擴增反應完成後,通過逐漸增加温度同時監測每一步的熒光信號來產生熔解曲線,熔解温度上有一特徵峯(Tm,DNA雙鏈解鏈50%的温度),用這個特徵峯就可以將特異產物與其它產物如引物二聚體區分開,因為它們在不同的温度熔解線。隨着反應中雙鏈DNA變性,熒光染料又恢復到遊離狀態導致熒光信號降低,用熒光信號改變與温度作圖。在擴增產物的只有染料法才需要做熔解曲線,探針法沒有必要,因為熔解曲線是由於染料法的特異性差,所以通過熔解曲線考察擴增產物是否是目標產物,與電泳的其中的一個目的相同,但熔解曲線畢竟是數學推導,並且結果中包含了儀器的誤差。