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熒光抗體技術

鎖定
熒光抗體技術,用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標本固定於玻片表面,滴加已知熒光抗體後再以緩衝液沖洗,乾燥後於熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體複合物; 陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不能與抗原結合,被衝冼掉)。該技術具有簡單、特異性高、敏感性低、同時檢測多種抗原時較複雜等特點。 [1] 
熒光抗體技術是以熒光物標記抗體進行抗原定位的技術。本技術較其他鑑定細菌的血清學方法有速度快、操作簡單、敏感性高等特點,它在臨牀檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。
中文名
熒光抗體技術
性    質
技術
特    徵
鑑定細菌的血清學方法
優    點
速度快、操作簡單

目錄

熒光抗體技術技術特點

本法較其他鑑定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌布氏桿菌炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。

熒光抗體技術應用

熒光抗體技術在臨牀檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用於菌種的鑑定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體,可用於流行病學調查和臨牀回顧診斷。免疫熒光用於梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術在病毒學檢驗中有重要意義,因為普通光學顯微鏡看不到病毒,用熒光抗體染色法可檢出病毒及其繁殖情況。
在寄生蟲感染診斷中,間接熒光抗體染色法有非常廣泛的應用。間接免疫熒光試驗(ifat)是當前公認的最有效的檢測瘧疾抗體的方法。常用抗原為瘧疾患者血液中紅內期裂殖體抗原。ifat對腸外阿米巴、尤其是阿米巴肝膿腫也有很高的診斷價值,所用抗原是阿米巴培養物懸液或提取的可溶性抗原。
免疫熒光法還是檢測自身抗體的好工具,在自身免疫病的實驗診斷中應用廣泛。其突出優點是能以簡單方法同時檢測抗體和與抗體起特異反應的組織成分,並能在同一組織中同時檢查抗不同組織成分的抗體。主要有抗核抗體、抗平滑肌抗體和抗線粒體抗體等。抗核抗體的檢測最常採用鼠肝作核抗原,可做成冰凍切片、印片或勻漿。用組織培養細胞如hep-2細胞或hela細胞塗片還可檢出抗着絲點抗體、抗中性粒細胞漿抗體等。應用免疫熒光技術可以檢出的其他自身抗體有抗(胃)壁細胞抗體、抗雙鏈dna抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體、抗甲狀腺微粒體抗體、抗骨髓肌抗體及抗腎上腺抗體等。
參考資料
  • 1.    賀淹才.基因工程概論:清華大學出版社,2008