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濃縮效應

鎖定
生物化學上指在進行SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳)中由於凝膠孔徑的不連續性(2種孔徑)、緩衝液離子成分的不連續性(2種緩衝體系)、pH值(3種pH)和電位梯度的不連續性使得蛋白質分子在濃縮膠和分離膠的界面處濃縮成一條狹小的縫帶,稱為濃縮效應。
中文名
濃縮效應
外文名
Concentration effect
構    成
SDS-PAGE、PH值等
特    徵
緩衝液離子成分的不連續性
分離對象
蛋白質分子
成型狀態
縫帶

目錄

濃縮效應主要條件

在不連續電泳系統中,含有上、下槽緩衝液(Tris—Gly,pH8.3)、濃縮膠緩衝液(Tri s—HCl,pH6.8)、分離膠緩衝液(Tri s—HCl, pH8.8),兩種凝膠的濃度(即孔徑)也不相同。

濃縮效應原理

在這種條件下,緩衝系統中的HCl幾乎全部解離成Cl-,兩槽中的Gly(pI一6.0,pK a=9.7) 只有很少部分解離成Gly的負離子,而酸性蛋白質也可解離出負離子。這些離子存電泳時都向正極移動。Cl-速度最快(先導離子),其次為蛋白質,Gly負離子最慢(尾隨離子)。由於Cl-很快超過蛋白離子,因此在其後面形成一個電導較低、電位梯度較陡的區域,該區電化梯度最高,這是在電泳過程中形成的電化梯度的不連續性,導致蛋白質和Gly離子加快移動,結果使蛋白質進入分離膠之前,快、慢離子之間濃縮成一薄層,有利於提高電泳的分辨率
濃縮效應 濃縮效應
濃縮效應 濃縮效應
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳