-
氫細菌
鎖定
- 拉丁學名
- hydrogen bacteria
- 界
- 細菌界
- 中文學名
- 氫細菌
- 應用方向
- 水體硝酸鹽的處理
氫細菌菌種介紹
作為氧化分子態氫時的末端電子受體,除氧以外,還往往利用硝酸鹽(上述脱氮副球菌)、硫酸鹽(硫酸鹽還原細菌)、二氧化碳(甲烷細菌)等。但是,硫酸鹽還原細菌等卻不能隨此反應而固定二氧化碳。分子態氫雖然可被氫化酶而活化,但在氫細菌中這種酶有的以可溶性直接還原NAD;有的為膜結合性的,而不直接還原NAD的。至於從氫往氧的電子傳遞途徑中,也尚未得到一致的見解。
氫細菌菌種分類
氫細菌篩選培養
氫細菌菌種篩選
氫細菌在化能自養微生物中是生長最快的一種,利用其自養以及對氫的利用可以對菌種進行篩選。總結起來需要注意以下幾點:不加入有機碳源,向含有必要營養元素的培養基中通入二氧化碳,氫氣混合氣體;視需要而定通入氧氣,加入硝酸鹽、硫酸鹽等;培養菌種選擇土壤浸出液;使用氣象色譜對初篩菌種進行復篩。
氫細菌材料
菌種為大連理工大學花園土壤。篩選培養基(μ/g/L),NH4Cl 2.0,Na2HPO4 0.75,KH2PO4 0.25,MgSO4 0.3,V(H2):V(O2):V(CO2)=7:1:1,pH=7。
氫細菌篩選流程
(1) 採用置換排氣法配氣:NADPH NADH NADH H2 CO2 H2 SHase SHase NAD+ 細胞膜 細胞質 ADP+Pi ATP Cytb CoQ 維生素K2 Cytc Cyta/a3 O2 琥珀酸 PHase PHase——顆粒狀氫化酶 SHase——可溶性氫化酶
(2) 斜面和平板培養條件下的配氣:先採用置換配氣法使緩衝瓶內充滿一定比例的氣體,真空乾燥器在無菌室滅菌後,將劃線斜面或平板放入其中,用真空泵將真空乾燥器抽成真空,然後與緩衝瓶連接。
(3) 菌種的篩選:在250mL血漿瓶內裝入30 mL液相培養基,用硅膠塞密封,滅菌,用無菌注射器接土壤上清液,再通過配氣裝置充入混合氣,30℃搖牀振盪培養,3~4d為一個富集週期,之後挑取單苗落劃線,恆温培養8~10d後獲菌種斜面。
(4) 培養條件的優化:每一培養條件的考察均採用篩選培養基,只改變待考察條件,測定培養液。
(6) 氣相色譜分析。
氫細菌培養方法
對篩選好的菌種根據不同類型,可以用幾種不同的方式培養,每篇文獻中採用的方法都不完全一致,這裏,經過總結,給出以下流程。
(1)通氣比例的確定:氣相比例對氫細菌生長代謝影響最大,因此實驗前要對最佳通氣比例進行測定。
(2)培養基的製備:根據不同電子受體配製培養基,注意保證二氧化碳作為唯一的碳源。
(3)供氫裝置:外部供氫法和內部供氫法(電解法)。