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有限稀釋法
鎖定
有限稀釋法是一種常用的
克隆方法,是指將需要再克隆的細胞株自培養孔內吸出並作細胞計數,計出1mL的細胞數。常用來篩選融合的
動物細胞。
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- 中文名
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有限稀釋法
- 釋 義
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一種常用的克隆方法
- 稀 釋
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HT培養液
- 環 境
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細胞濃度為50~60個/mL的培養液
操作過程
用HT培養液稀釋, 使細胞濃度為50~60個/mL,於96孔培養板中每孔加0.1mL(5.5個細胞/孔)。接種2排,剩餘細胞懸液用HT培養液作倍比稀釋,再接種2排,如此類推,直至使每孔含半個或一個細胞。培養7~10天后,選擇單個
克隆生長的陽性孔再一次進行克隆。一般需要如此重複3~5次,直至達100%
陽性孔率時即可,以確保抗體由單個克隆所產生。
- 參考資料
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