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基因表達檢測
鎖定
基因表達檢測是一個生物學檢測方法。
- 中文名
- 基因表達檢測
- 所屬學科
- 生物學
基因表達檢測背景知識
熒光定量PCR技術是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時監控反應過程。隨着PCR 反應的進行,反應產物不斷累積,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一次熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,結合相應的軟件對產物進行分析,可以得到熒光擴增曲線,計算待測樣品初始模版的量。實時熒光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍,運用該項技術,可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、絕對定量和定性分析。
基因表達檢測服務項目
1.相對定量
包括RNA提取、反轉錄和擴增,採用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式,一般採用2- ΔΔ Ct 法進行計算。每個樣本重複三次,一般情況我公司提供內參基因引物。
2.絕對定量
需要製備標準品並建立標準曲線,然後檢測目的樣本中的基因,比對標準曲線得到基因準確拷貝數。
基因表達檢測送樣要求
細胞(≥106 )、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、葉片(≥100mg)等樣品材料,基因組DNA或總RNA(體積≥20μl,濃度≥50 ng/μl)。
基因表達檢測提供結果
引物和探針及序列,反轉錄膠圖,原始數據(包括擴增曲線和熔解曲線)、數據分析結果及實驗報告。
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