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Sanger測序法

鎖定
Sanger測序法就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),並混入限量的一種不同的雙脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。 [1] 
中文名
Sanger測序法
所屬學科
生物學
由於ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。終止點由反應中相應的雙脱氧而定。每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調整,使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。它們具有共同的起始點,但終止在不同的的核苷酸上,可通過高分辨率變性凝膠電泳分離大小不同的片段。
參考資料
  • 1.    郜金榮.分子生物學:化學工業出版社,2011