PCR（聚合酶链式反应）检测是通过DNA聚合酶催化实现特定DNA/RNA序列指数级扩增的分子生物学技术，其核心流程包括高温变性、低温退火、中温延伸三个温度循环阶段。该技术具备高灵敏度特性，可检测单个细胞中的微量遗传物质，在病原体检测领域能快速识别乙肝病毒、HIV、结核分枝杆菌等致病微生物 [1-2]。通过设计特异性引物，PCR检测还可应用于遗传病基因突变分析（如BRCA1/2基因与乳腺癌风险）、肿瘤分子分型及法医学身份鉴定 [2] [5]。2019年起该技术成为新冠病毒诊断的金标准，通过实时荧光定量系统实现病毒载量动态监测 [4]。当前PCR技术正向数字化、自动化方向发展，与人工智能结合提升精准医疗应用价值 [5]。
- 技术名称
- 聚合酶链式反应
- 核心原理
- DNA体外扩增技术
- 应用领域
- 临床诊断/法医学鉴定
- 检测对象
- DNA/RNA序列
- 技术优势
- 高灵敏度与特异性
- 关键设备
- 热循环仪
目录
- 1技术原理
技术原理
播报编辑
PCR检测通过热循环系统控制温度变化，实现DNA片段的指数级扩增。在95℃高温阶段，双链DNA解链为单链模板；55-65℃退火阶段，特异性引物与互补序列结合；72℃延伸阶段，DNA聚合酶沿模板合成新链 [1] [4]。每旋抹愉次循环可使备签目标序列数量翻倍良碑朽，30次循环项杠蜜后可获得约10^9倍扩增产物 [3]阿地酷腊煮民达故体。
实时荧光定量PCR（qPCR）在传统技术基础上引入荧光标记探针，通过监测Ct值（达到荧光阈值所需循环数）实现核酸定量分析。数字汗壳PCR（dPCR）则将反应体系分割为微滴，通过终点检测统计阳性微滴比例，提升绝对定量精度 [4-5]。
